采用间接法ELISA,将纯化的抗原包被于微孔板,样本中的IgG4抗体与包被抗原结合,洗涤后加入酶标记的抗人IgG4抗体,形成“固相抗原-IgG4抗体-酶标二抗”复合物。加入底物后,酶催化底物显色,颜色深浅与样本中IgG4抗体的含量成正比。通过测定OD值并与标准曲线对比,可定量检测样本中IgG4抗体的水平。
产品名称
人免疫球蛋白G4抗体(IgG4Ab)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/ml
英文名称
human IgG4Ab elisa kit
货号
PH23836
检测范围
0.15625ng/ml-10ng/ml
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:间接 ELISA 法
种属反应性:仅人
检测时间:90-110min
保存条件:2-8℃低温密封存放
特异性:特异性定量识别人源 IgG4 型抗体
板内变异系数:≤8%操作步骤:
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液。静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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