运用竞争ELISA法,将纯化的人SPR包被于微孔板表面。样本中的SPR与微孔板上的固相SPR竞争结合特异性SPR抗体,未结合的成分被洗涤去除。然后加入酶标记的二抗,与结合在固相上的SPR抗体结合,最后通过底物显色。样本中SPR浓度越高,显色反应越弱,通过标准曲线可计算样本中SPR的含量。
产品名称
人墨蝶呤还原酶(SPR)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/mL
英文名称
human SPR elisa kit
货号
PH20480
检测范围
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:仅人
检测时间:100-120min
保存条件:2-8℃低温避光
特异性:特异性识别人 SPR 还原酶
板内变异系数:≤8%操作步骤:
试剂准备:所有试剂恢复至室温(18–25℃),洗涤液如有结晶需加热溶解;
标准品配制:将冻干标准品用1mL标准品稀释液溶解,得2000 pg/mL原液,再倍比稀释成7个浓度梯度,另设空白孔(仅稀释液);
加样:每孔加入50μL样本或标准品,37℃孵育30–60分钟;
洗板:弃去孔内液体,用1×洗涤液洗板5次,拍干;
加酶标抗体:每孔加入100μL检测抗体-HRP,37℃孵育1小时;
洗板:同上;
显色:每孔加入50μL底物A + 50μL底物B,37℃避光孵育10–30分钟;
终止:每孔加入50μL终止液,颜色由蓝变黄;
读数:在450 nm波长下用酶标仪测定OD值,根据标准曲线计算样本浓度。
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上海博湖生物科技有限公司
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