采用双抗体夹心法,针对SEMG1蛋白的特异性表位设计配对抗体。捕获抗体包被于酶标板,样本中的SEMG1与之结合后,加入HRP标记的检测抗体。经孵育、洗涤和底物显色后,根据OD值与标准曲线的关系计算含量,反映精子发生和男性不育相关状态。
产品名称
人生精蛋白I(SEMG1)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/mL
英文名称
human SEMG1 elisa kit
货号
PH20841
检测范围
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:仅人
检测时间:2.5-3h
保存条件:2-8℃冷藏
特异性:仅识别 SEMG1 蛋白
板内变异系数:CV<8%操作步骤:
试剂准备:所有试剂恢复至室温(18–25℃),洗涤液如有结晶需加热溶解;
标准品配制:将冻干标准品用1mL标准品稀释液溶解,得2000 pg/mL原液,再倍比稀释成7个浓度梯度,另设空白孔(仅稀释液);
加样:每孔加入50μL样本或标准品,37℃孵育30–60分钟;
洗板:弃去孔内液体,用1×洗涤液洗板5次,拍干;
加酶标抗体:每孔加入100μL检测抗体-HRP,37℃孵育1小时;
洗板:同上;
显色:每孔加入50μL底物A + 50μL底物B,37℃避光孵育10–30分钟;
终止:每孔加入50μL终止液,颜色由蓝变黄;
读数:在450 nm波长下用酶标仪测定OD值,根据标准曲线计算样本浓度。
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上海博湖生物科技有限公司
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