采用双抗体夹心法,将抗人pRB抗体包被于微孔板,样本中的pRB与包被抗体结合后,加入HRP标记的pRB检测抗体。形成的夹心复合物经洗涤后加入底物显色,颜色深浅与pRB浓度成正比,通过酶标仪读取结果并计算浓度,反映细胞周期调控和肿瘤发生相关状态。
产品名称 | 人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名称 | human pRB elisa kit | 货号 | PH21556 |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:仅人
检测时间:2.5-3h
保存条件:2-8℃冷藏
特异性:特异性识别磷酸化 / 总 pRB 蛋白
板内变异系数:CV<8%
试剂准备:
平衡:所有试剂回温至室温(20–25℃)。
洗涤液(1×):30 mL 25× 浓缩洗液 + 720 mL 去离子水,混匀,2–8℃可存 1 个月。
标准品稀释:
每瓶标准品加1 mL稀释液,静置 15 min,轻柔混匀(避免气泡),得最高浓度 S7。
准备 7 个 EP 管,各加250 μL稀释液,倍比稀释:
S7:原液(如 160 μg/L)
S6:250 μL S7 + 250 μL 稀释液
S5 至 S1 依次稀释
S0:稀释液(空白对照)
生物素化抗体(1×):按 1:100 稀释(如 12 μL 100× 浓缩 + 1.2 mL 稀释液),现配现用。
SAV‑HRP(1×):按 1:100 稀释,现配现用,避光。
常见问题
高背景:洗板不足、SAV‑HRP 浓度过高、孵育温度过高 / 时间过长、污染。
标准曲线线性差:标准品稀释错误、孵育时间不准、读数超时。
样品值偏低:样品降解、稀释倍数过高、加样误差。
公司正在出售的产品:
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大鼠Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)elisa试剂盒 | 大鼠抗双链DNA抗体;天然DNA抗体(dsDNA)酶联免疫试剂盒 | 大鼠胰岛素受体α(ISR-α)检测试剂盒 |
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关键字: 人视网膜母细胞瘤抑制蛋白;pRB;elisa试剂盒;
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