人磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA)elisa试剂盒
商品属性:
英文名称
human PaCoA elisa kit
灵敏度
0.078125ng/mL
检测范围
0.15625ng/mL-10ng/mL
货号
PH22168
核心参数:
检测原理:竞争法 ELISA
种属反应性:仅人
检测时间:90-110min
保存条件:2-8℃低温密封
特异性:专一识别磷酸化乙酰辅酶 A
板内变异系数:≤8%
夹心法数据:
夹心法标曲:
产品定义:
采用竞争法:将磷酸化乙酰辅酶A包被于酶标板微孔,样本中的PaCoA与HRP标记的PaCoA抗体竞争性结合包被抗原。样本中PaCoA浓度越高,与抗体结合的包被抗原越少,最终显色越浅。通过标准曲线计算样本中PaCoA的浓度,反映细胞能量代谢与乙酰化修饰相关状态。试剂准备:
平衡:所有试剂回温至室温(20–25℃)。
洗涤液(1×):30 mL 25× 浓缩洗液 + 720 mL 去离子水,混匀,2–8℃可存 1 个月。
标准品稀释:
每瓶标准品加1 mL稀释液,静置 15 min,轻柔混匀(避免气泡),得最高浓度 S7。
准备 7 个 EP 管,各加250 μL稀释液,倍比稀释:
S7:原液(如 160 μg/L)
S6:250 μL S7 + 250 μL 稀释液
S5 至 S1 依次稀释
S0:稀释液(空白对照)
生物素化抗体(1×):按 1:100 稀释(如 12 μL 100× 浓缩 + 1.2 mL 稀释液),现配现用。
SAV‑HRP(1×):按 1:100 稀释,现配现用,避光。
常见问题
高背景:洗板不足、SAV‑HRP 浓度过高、孵育温度过高 / 时间过长、污染。
标准曲线线性差:标准品稀释错误、孵育时间不准、读数超时。
样品值偏低:样品降解、稀释倍数过高、加样误差。
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