人磷脂酰基醇–3,4,5-三磷酸依赖性Rac交换因子1(PREX-1)elisa试剂盒
商品属性:

英文名称 | human PREX-1 elisa kit | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 货号 | PH21540 |
核心参数:

检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:仅人
检测时间:90-110min
保存条件:2-8℃恒温避光
特异性:专一靶向人 PREX1 交换因子
板内变异系数:≤8%
夹心法数据:

| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000
|
夹心法标曲:


产品定义:

采用双抗体夹心法:用纯化的PREX-1抗体包被微孔板,样本中的PREX-1抗原与包被抗体结合后,再加入HRP标记的PREX-1检测抗体。形成的夹心复合物经过洗涤后,加入底物产生显色反应,颜色深浅与样本中PREX-1浓度成正比,通过酶标仪读取结果并计算浓度,反映Rac信号通路活化与细胞迁移相关状态。
操作步骤:

试剂盒平衡:实验前20分钟将试剂盒从冰箱取出,平衡至室温(20-25℃)
板条准备:从铝箔袋中取出所需板条,剩余板条密封放回2-8℃保存
加样
标准品孔:加入不同浓度标准品50μL(浓度通常为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL)
样本孔:先加样本稀释液40μL,再加待测样本10μL(最终稀释5倍)
空白孔:不加任何液体
加酶标抗体:除空白孔外,每孔加入HRP标记的检测抗体100μL
温育:封板膜封板后,37℃温育60分钟
洗涤
弃去孔内液体,吸水纸上拍干
每孔加满洗涤液(350μL),静置1分钟后弃去,重复洗板5次
最后一次洗涤后彻底拍干孔内液体
显色:每孔加入显色剂A、B各50μL,轻轻混匀,37℃避光显色15分钟
终止反应:每孔加入终止液50μL,蓝色立即转为黄色
读数:15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值
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