Recombinant Mouse IL-33规格
IL-33属于IL-1细胞因子超家族成员，其核心功能是作为“警报素”（Alarmin），在细胞受到损伤或应激时从细胞核释放，通过与受体ST2（IL-1RL1）结合，招募MyD88、IRAK及TRAF6等接头蛋白，激活NF-κB和MAPK信号通路。它在免疫调节中扮演双重角色：一方面作为转录抑制因子在核内发挥功能；另一方面作为细胞外细胞因子，强烈诱导Th2型免疫应答，促进IL-4、IL-5、IL-13等细胞因子的产生，并激活肥大细胞、嗜酸性粒细胞及2型固有淋巴细胞（ILC2s）。
商品介绍：
A-01K101887-50μg | Recombinant Mouse IL-33规格 |
A-01K101887-200ug | Recombinant Mouse IL-33规格 |
A-01K101887-1mg | Recombinant Mouse IL-33规格 |
别称：C9orf26, CHROMOSOME 9 OPEN READING FRAME 26, DKFZp586H0523, DVS27, DVS27 related protein, IL 1F11, IL 33, IL-1F11, IL-33, IL1F11, IL33, IL33_HUMAN, Interleukin 1 family member 11, Interleukin 33, INTERLEUKIN 33 NFHEV, Interleukin 33 precursor, Interleukin-1 family member 11, Interleukin-33 (109-270), Interleukin33, NF HEV, NF-HEV, NFEHEV, NFHEV, Nuclear factor for high endothelial venules
标签：N-terminal His Tag
种属：Mouse
宿主：E.Coli
表达区间：109-266
分子量：17.3 kDa
Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用：Western Blot, ELISA
性状：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
纯度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
检测原理详解：
包被抗体结合
实验开始前，微孔板已预先包被抗人白脂素单克隆抗体。当加入待测样本后，
样本中的人白脂素（Asprosin）会与固相载体上的捕获抗体特异性结合。
形成“夹心复合物”
洗涤去除未结合物质后，加入生物素标记的检测抗体，该抗体与白脂素分子的另一表位结合，
形成“固相抗体—抗原—检测抗体”三明治结构。
酶促显色反应
随后加入?辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，与生物素检测抗体结合。
最后加入TMB显色底物，在HRP催化下产生蓝色产物，反应终止后变为黄色。
浓度定量分析
黄色深浅与样本中白脂素含量成正比，通过酶标仪在450nm波长处测定吸光度（OD值），
并根据标准曲线计算出样本中白脂素的浓度。
公司正在出售的产品：
死亡效应结构域蛋白2 | 细胞长链酮脂酰硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
FAM162A蛋白 | 细胞钠离子（Na）浓度荧光定量酶联免疫试剂盒 |
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组蛋白H1激酶免疫共沉淀pcr检测试剂盒 | 石蜡切片淀粉样蛋白（AMYLOID）染色试剂盒 |
高度发散同源异型盒蛋白 | 组织异戊二烯焦磷酸异构酶（isopentenyl pyrophosphate isomerase）活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
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溶菌酶重组兔单克隆 | AP-1μ2抗体 |
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PUM2蛋白 | AF680标记的白介素1β抗体 |
Recombinant Human MYBPC3 | Recombinant Human Elongation factor 1-gamma |
实验步骤：
1. 基因克隆与表达载体构建
从人类FBN1基因C端序列中扩增Asprosin编码片段（约140aa）。
将目的片段插入原核表达载体，确保带有?N端或C端His标签，便于后续纯化。
转化至?感受态细胞，筛选阳性克隆并测序验证。
2. 重组蛋白诱导表达
取阳性菌落接种于LB培养基（含氨苄青霉素），37℃振荡培养过夜。
次日按1:100比例转接至新鲜LB培养基，37℃培养至OD600达0.6–0.8。
加入IPTG至终浓度0.1–1.0 mM，16–25℃诱导表达6–12小时（低温诱导有助于可溶性达）。
4℃、8000×g离心10分钟收集菌体，弃上清，-20℃保存备用。
3. 菌体裂解与蛋白提取
将菌体沉淀重悬于裂解缓冲液（如PBS + 1% Triton X-100 + 蛋白酶抑制剂），超声破碎
（冰浴条件下，每次30秒，共6–10次，功率30%）。
4℃、12000×g离心20分钟，收集上清（可溶性蛋白）或沉淀（包涵体蛋白）。
若为包涵体蛋白，需用?洗涤缓冲液（含2M尿素的PBS）洗涤2–3次，去除杂蛋白。
4. 亲和层析纯化（Ni-NTA法）
将含His标签的蛋白溶液（或溶解后的包涵体蛋白，使用含6–8M尿素的缓冲液溶解）上样至?Ni-NTA亲和层析柱。
用?洗涤缓冲液（含20–40mM咪唑）洗去非特异性结合蛋白。
用?洗脱缓冲液（含250–500mM咪唑）梯度洗脱目标蛋白，收集洗脱峰。
透析去除尿素与咪唑（使用PBS或生理缓冲液，4℃过夜，更换3次）。
5. 蛋白复性（针对包涵体蛋白）
若蛋白以包涵体形式表达，需在纯化后进行?梯度复性：
将变性蛋白缓慢加入含?梯度降低尿素（6M → 4M → 2M → 0M）的复性缓冲液中，4℃搅拌过夜。或采用?透析法?逐步去除变性剂。复性后再次离心取上清，检测蛋白活性。
关键字： IL-33;Mouse;E.Coli;
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