人无翅型MMTV整合位点家族成员10A(WNT10A)elisa试剂盒
商品属性:

英文名称 | human WNT10A elisa kit | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 货号 | PH19492 |
核心参数:

检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:仅人
检测时间:2.5-3h
保存条件:2-8℃冷藏
特异性:不和其他 WNT 家族蛋白交叉
板内变异系数:CV<8%
夹心法数据:

| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000
|
夹心法标曲:


产品概述:

采用双抗体夹心法:针对WNT10A蛋白的特异性表位设计配对抗体。捕获抗体包被于酶标板,样本中的WNT10A与之结合后,加入HRP标记的检测抗体。经过孵育、洗涤和底物显色后,根据OD值与标准曲线的关系计算样本中WNT10A的含量,反映Wnt信号通路和胚胎发育相关状态。
操作步骤:

试剂盒平衡:实验前20分钟将试剂盒从冰箱取出,平衡至室温(20-25℃)
板条准备:从铝箔袋中取出所需板条,剩余板条密封放回2-8℃保存
加样
标准品孔:加入不同浓度标准品50μL(浓度通常为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL)
样本孔:先加样本稀释液40μL,再加待测样本10μL(最终稀释5倍)
空白孔:不加任何液体
加酶标抗体:除空白孔外,每孔加入HRP标记的检测抗体100μL
温育:封板膜封板后,37℃温育60分钟
洗涤
弃去孔内液体,吸水纸上拍干
每孔加满洗涤液(350μL),静置1分钟后弃去,重复洗板5次
最后一次洗涤后彻底拍干孔内液体
显色:每孔加入显色剂A、B各50μL,轻轻混匀,37℃避光显色15分钟
终止反应:每孔加入终止液50μL,蓝色立即转为黄色
读数:15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值
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