本试剂盒用于定量检测小鼠样本内 FOXO3 蛋白表达水平,该蛋白属于叉头转录因子家族,广泛参与细胞增殖凋亡、代谢调控、氧化应激及衰老进程,在机体组织稳态维持、肿瘤发生与免疫调节中发挥关键作用,可适配血清、组织裂解液、细胞上清等常见生物样本,适用于相关生理病理机制与药物作用研究。
产品名称 | 小鼠叉头框蛋白O3(FOXO3)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名称 | Mouse FOXO3 elisa kit | 货号 | PM17403 |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夹心法标曲:
核心参数:
- 检测原理:双抗体夹心法,将特异性抗小鼠FOXO3单克隆抗体包被于96孔微孔板,加入标准品和标本后,再加入生物素化抗小鼠FOXO3单克隆抗体、HRP标记链亲和素,最后加入TMB底物显色,颜色深浅与样品中FOXO3蛋白含量呈正相关
- 种属反应性:小鼠
- 检测时间:约2小时
- 保存条件:未拆封时4℃冷藏;长期存放可置于-20℃;已拆开标准品-20℃保存,其它4℃保存
- 特异性:可检测天然或重组的小鼠FOXO3,与其他相关蛋白无交叉反应
- 板内/板间变异系数:通常≤10%/≤15%
试剂准备:
平衡:所有试剂回温至室温(20–25℃)。
洗涤液(1×):30 mL 25× 浓缩洗液 + 720 mL 去离子水,混匀,2–8℃可存 1 个月。
标准品稀释:
每瓶标准品加1 mL稀释液,静置 15 min,轻柔混匀(避免气泡),得最高浓度 S7。
准备 7 个 EP 管,各加250 μL稀释液,倍比稀释:
S7:原液(如 160 μg/L)
S6:250 μL S7 + 250 μL 稀释液
S5 至 S1 依次稀释
S0:稀释液(空白对照)
生物素化抗体(1×):按 1:100 稀释(如 12 μL 100× 浓缩 + 1.2 mL 稀释液),现配现用。
SAV‑HRP(1×):按 1:100 稀释,现配现用,避光。
常见问题
高背景:洗板不足、SAV‑HRP 浓度过高、孵育温度过高 / 时间过长、污染。
标准曲线线性差:标准品稀释错误、孵育时间不准、读数超时。
样品值偏低:样品降解、稀释倍数过高、加样误差。
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关键字: 小鼠叉头框蛋白O3;FOXO3;elisa试剂盒;
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