可检测小鼠 TLSP 蛋白酶,该酶活性近似胰蛋白酶,参与局部组织炎症介质活化、细胞外基质分解,过敏反应、炎性病灶中释放增多,介导局部组织损伤与免疫应答,适用于过敏炎症相关实验研究。
产品名称 | 小鼠类胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶(TLSP)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名称 | Mouse TLSP elisa kit | 货号 | PM15142 |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夹心法标曲:
核心参数:
- 检测原理:双抗体夹心ELISA法,利用抗原抗体特异性结合和酶催化底物显色实现定量分析
- 种属反应性:小鼠
- 检测时间:约1.5-2.5小时
- 保存条件:2-8℃密封保存,避免反复冻融
- 特异性:特异性识别小鼠TLSP,与其他丝氨酸蛋白酶无交叉反应
- 板内/板间变异系数:通常≤10%/≤15%
操作流程:
加样
设置标准品孔、样本孔和空白孔:标准品孔加入不同浓度的标准品50μL;样本孔先加样本稀释液40μL,再加待测样本10μL(样本最终稀释5倍,结果需乘以5);空白孔不加任何液体
温育
除空白孔外,每孔加入HRP标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃温育60分钟
洗板
弃去孔内液体,在吸水纸上拍干;每孔加满洗涤液,静置1分钟后弃去,重复洗板5次;最后一次洗板后需将孔内液体彻底拍干
显色
每孔加入底物液A、B各50μL,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
终止反应
每孔加入终止液50μL,此时蓝色会立即转为黄色
读数
以空白孔调零,15分钟内用酶标仪测定450nm波长下各孔的吸光度(OD值)
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