测定小鼠 PLCG 水解酶蛋白,该酶分解磷脂酰肌醇产生第二信使,开启胞内钙信号与蛋白激酶通路,调控细胞增殖、免疫活化、细胞迁移,广泛参与多类生理病理信号传导过程。
产品名称 | 小鼠磷酯酶Cγ1(PLCG)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名称 | Mouse PLCG elisa kit | 货号 | PM15813 |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夹心法标曲:
核心参数:
- 检测原理:双抗体夹心ELISA法,利用抗原抗体特异性结合和酶催化底物显色实现定量分析
- 种属反应性:小鼠
- 检测时间:约1.5-2.5小时
- 保存条件:2-8℃冷藏保存,避免阳光直射和冻融
- 特异性:特异性识别小鼠PLCG,与其他磷酯酶无交叉反应
- 板内/板间变异系数:通常≤10%/≤15%
操作步骤:
试剂盒平衡:实验前20分钟将试剂盒从冰箱取出,平衡至室温(20-25℃)
板条准备:从铝箔袋中取出所需板条,剩余板条密封放回2-8℃保存
加样
标准品孔:加入不同浓度标准品50μL(浓度通常为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL)
样本孔:先加样本稀释液40μL,再加待测样本10μL(最终稀释5倍)
空白孔:不加任何液体
加酶标抗体:除空白孔外,每孔加入HRP标记的检测抗体100μL
温育:封板膜封板后,37℃温育60分钟
洗涤
弃去孔内液体,吸水纸上拍干
每孔加满洗涤液(350μL),静置1分钟后弃去,重复洗板5次
最后一次洗涤后彻底拍干孔内液体
显色:每孔加入显色剂A、B各50μL,轻轻混匀,37℃避光显色15分钟
终止反应:每孔加入终止液50μL,蓝色立即转为黄色
读数:15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值
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关键字: 小鼠磷酯酶Cγ1;PLCG;elisa试剂盒;
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