蛋白激酶B单克隆抗体
原理特点
该单克隆抗体针对蛋白激酶B(AKT)单一特异性抗原表位制备,抗体均一性高、特异性极致,精准靶向AKT蛋白,无家族外蛋白交叉反应,非特异性背景极低,检测精度与重复性优异,可精准定量检测AKT蛋白表达水平,适用于AKT信号通路高精度分析、肿瘤靶向机制、药物靶点验证等高端科研实验。
英文名称:AKT Mouse mAb
中文名称:蛋白激酶B单克隆抗体

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:AKT 1; AKT; AKT1; AKT-1; AKT1_HUMAN; C AKT; cAKT; MGC9965; MGC99656; Oncogene AKT1; PKB; PKB alpha; PKB-ALPHA; PRKBA; Protein Kinase B alpha; Protein kinase B; Proto-oncogene c-Akt; RAC alpha; RAC alpha serine/threonine protein kinase; RAC; RAC PK alpha; Rac protein kinase alpha; RAC Serine/Threonine Protein Kinase; RAC-alpha serine/threonine-protein kinase; RAC-PK-alpha; v akt murine thymoma viral oncogene homolog 1; vAKT Murine Thymoma Viral Oncogene Homolog 1.
交叉反应:Human
抗体来源:Mouse
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human AKT
亚型:IgG
性状:Size : 50ul/100ul/200ul <br/> Liquid<br/><br/>Size : 200ug (PBS only) <br/> Lyophilized<br/> Note: Centrifuge tubes before opening. Reconstitute the lyophilized product in distilled water. Optimal concentration should be determined by the end user.
纯化方法:affinity purified by Protein G
克隆类型:Monoclonal
克隆号:10D8
理论分子量:56 kDa
浓度:1mg/ml
储存液:Size : 50ul/100ul/200ul<br/>0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.Size : 200ug (PBS only)<br/>0.01M PBS
保存条件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
抗体优势:蛋白激酶B(AKT)单克隆抗体具有高特异性、高亲和力和批次间一致性好的优点,可精准识别AKT蛋白及其磷酸化形式,确保检测准确性和可靠性。
实验应用:AKT单克隆抗体适用于多种实验方法,如Western Blot、ELISA和免疫组化等,可高效检测AKT表达和活性,辅助研究细胞信号通路和肿瘤发病机制。
临床意义:AKT单克隆抗体可用于肿瘤诊断和预后评估,检测肿瘤组织中AKT表达和活性,指导临床治疗方案的制定,开发靶向治疗药物。
样本处理与实验操作
1. Western Blot(免疫印迹)
样本制备
细胞样本:PBS洗涤2-3次,加入RIPA裂解液(含1% PMSF和磷酸酶抑制剂),冰上裂解30分钟,12000rpm离心15分钟取上清,BCA法定量蛋白浓度
组织样本:液氮研磨成粉末,加入裂解液冰上裂解,离心后取上清,调整蛋白浓度至一致
变性处理:加入5×SDS上样缓冲液,95℃加热5-10分钟,冷却后上样
抗体孵育
转膜完成后,用5% BSA或牛奶封闭液室温封闭1-2小时
一抗稀释后4℃孵育过夜(12-16小时),或室温孵育1-2小时;孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中
TBST缓冲液洗涤3次,每次5分钟;加入二抗(1:5000-1:10000稀释)室温孵育1-2小时
再次洗涤后,用ECL发光液显影,通过凝胶成像系统采集图像
2. IHC-P(石蜡切片免疫组化)
样本前处理
脱蜡水化:依次放入二甲苯(2次,每次10分钟)、无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇(各5分钟),最后用PBS冲洗
抗原修复:将切片放入柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)中,微波炉加热至沸腾,保持10-15分钟,自然冷却至室温
封闭处理:3% H₂O₂室温孵育10分钟灭活内源性过氧化物酶,PBS冲洗后用10%山羊血清封闭30分钟
抗体孵育
一抗稀释后滴加在切片上,4℃孵育过夜;孵育时置于湿盒中,防止液体挥发
次日室温复温30分钟,PBS冲洗3次,每次5分钟;加入二抗(生物素标记)室温孵育30分钟
PBS冲洗后,加入ABC复合物室温孵育30分钟,DAB显色剂显色(显微镜下观察控制时间,通常3-10分钟),苏木素复染后脱水封片
3. ICC/IF(细胞免疫荧光)
样本制备
细胞爬片培养至70-80%汇合度,PBS洗涤2次,4%多聚甲醛固定15-20分钟
通透处理(根据抗体类型选择):0.1% Triton X-100室温孵育10分钟,PBS冲洗3次
封闭处理:5% BSA室温封闭30-60分钟,减少非特异性结合
抗体孵育
一抗稀释后滴加在爬片上,4℃孵育过夜,或室温孵育1-2小时
PBS冲洗3次,每次5分钟;加入荧光标记二抗(1:200-1:500稀释),室温避光孵育30-60分钟
再次冲洗后,用抗淬灭封片液封片,荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察采集图像
4. ELISA(酶联免疫吸附试验)
包被与封闭
用包被缓冲液(如碳酸盐缓冲液pH9.6)稀释抗原至合适浓度,每孔加入100μl,4℃包被过夜
弃去包被液,PBST洗涤3次,每次3分钟;加入封闭液(5% BSA)每孔200μl,37℃孵育1-2小时
抗体孵育
一抗按比例稀释后,每孔加入100μl,37℃孵育1-2小时,或4℃孵育过夜
PBST洗涤3次,加入稀释好的酶标二抗,每孔100μl,37℃孵育1小时
洗涤后加入底物溶液(如TMB)每孔100μl,37℃避光显色10-20分钟,加入终止液(2M H₂SO₄),用酶标仪在450nm波长读取OD值
公司正在出售的产品
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5色氨酸羟化酶2抗体 | 蛋白激酶B单克隆抗体碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗鸡IgG H&L | MAP1A/Mtap1a Antibody Blocking Peptide |
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N末端天冬酰胺酰胺酶抗体 | 碱性磷酸酶(AP)标记的小鼠抗人IgG H&L | CD38 Antibody Blocking Peptide |
关键字: 蛋白激酶B单克隆抗体;Mouse;56 kDa;
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