耳聋相关常染色体显性遗传5抗体
原理特点
该抗体靶向耳聋相关常染色体显性遗传5编码蛋白,该蛋白参与内耳毛细胞发育、听觉功能维持。抗体特异性强,可精准检测该耳聋相关蛋白的表达与异常缺失,适用于遗传性耳聋发病机制、内耳发育异常、听觉功能调控相关科研研究。
英文名称:DFNA5 Rabbit pAb
中文名称:耳聋相关常染色体显性遗传5抗体

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:2310037D07Rik; 4932441K13Rik; Deafness, autosomal dominant 5; Deafness, autosomal dominant 5 protein; DFNA5 gene; DFNA5_HUMAN; Dfna5h; EG14210; Fin15; ICERE 1; ICERE-1; Inversely correlated with estrogen receptor expression 1; Non-syndromic hearing impairment protein 5; Nonsyndromic hearing impairment protein; GSDME.
交叉反应:Mouse,Rat
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human DFNA5
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量:54 kDa
浓度:1mg/ml
储存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
听力保护:耳聋相关常染色体显性遗传5(DFNA5/GSDME)是Gasdermin家族成员,在细胞凋亡时被Caspase-3切割,形成N端片段,导致细胞膜穿孔和细胞焦亡,参与听力保护。
疾病关联:DFNA5基因突变可导致非综合征性常染色体显性遗传性耳聋,其抗体可用于疾病诊断和研究听力保护机制。
肿瘤关联:GSDME在多种肿瘤中表达异常,参与肿瘤细胞的凋亡和焦亡,其抗体可用于检测GSDME表达,评估肿瘤预后和治疗效果。
核心实验操作方法
1. Western Blot(WB)
抗体孵育
一抗孵育:用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度(如1:1000),4℃摇床缓慢孵育过夜;或室温孵育1-2小时,孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。
洗涤:用TBST缓冲液洗涤3次,每次5分钟,洗去未结合的一抗;加入HRP标记二抗(1:5000-1:10000稀释),室温孵育1小时。
显影:再次洗涤后,加入ECL发光液孵育1-2分钟,用化学发光成像仪采集图像,根据信号强度调整曝光时间。
2. 免疫组化(IHC)
抗体孵育
一抗孵育:滴加稀释后的一抗(如1:200)于组织切片上,置于湿盒中4℃孵育过夜;次日室温复温30分钟,PBS冲洗3次,每次5分钟。
二抗结合:加入生物素标记二抗(1:200)室温孵育30分钟,PBS冲洗后加入ABC复合物(1:100)室温孵育30分钟。
显色封片:DAB显色剂显色3-10分钟(显微镜下观察控制时间),苏木素复染1分钟,梯度乙醇脱水后中性树胶封片。
3. 免疫荧光(IF)
抗体孵育
一抗孵育:用5% BSA稀释抗体至工作浓度(如1:100),滴加在细胞爬片上,4℃避光孵育过夜;室温复温后PBS冲洗3次,每次5分钟。
二抗结合:加入荧光标记二抗(如FITC标记抗兔IgG,1:200),室温避光孵育30-60分钟;PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。
观察:荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察,激发波长根据二抗标记物选择(如FITC为488nm)。
4. ELISA实验
包被与孵育
包被:用包被缓冲液(pH9.6碳酸盐缓冲液)稀释抗原至1-10μg/ml,每孔加入100μl,4℃过夜孵育。
封闭与一抗孵育:弃去包被液,PBST洗涤3次,加入5% BSA封闭液200μl/孔,37℃孵育1小时;加入稀释后的一抗100μl/孔,37℃孵育1-2小时或4℃过夜。
检测:洗涤后加入酶标二抗(1:5000),37℃孵育1小时;TMB底物溶液显色10-30分钟,2M硫酸终止反应后,酶标仪450nm波长读取OD值。
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关键字: 耳聋相关常染色体显性遗传5抗体;Rabbit;54 kDa;
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