产品属性

产品名称 | 糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体抗体 | 货号 | YS-K7477 |
英文名称 | TNFRSF18 Rabbit pAb | 用途 | 仅供科研实验 |
商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:Activation inducible TNFR family receptor; Activation-inducible TNFR family receptor; AITR; CD357; GITR; GITR D; GITR-D; GITRD; Glucocorticoid induced TNFR related protein; glucocorticoid-induced tnf receptor ligand; glucocorticoid-induced tnf receptors ligand; Glucocorticoid-induced TNFR-related protein; TNF receptor superfamily activation inducible protein; TNFRSF 18; TNR18_HUMAN; Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18; Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 precursor;
交叉反应:Human
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse TNFRSF18
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量:24 kDa
浓度:1mg/ml
储存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特点

GITR是TNF受体超家族成员,组成性高表达在调节性T细胞(Treg)上,活化T细胞也上调表达。其配体GITRL在抗原呈递细胞上表达,激活GITR信号可增强效应T细胞功能并减弱Treg抑制活性。该抗体是肿瘤免疫治疗和自身免疫研究中重要的免疫检查点工具。
靶点背景

GITR 表达于 Treg、效应 T 细胞、巨噬细胞,糖皮质激素可上调其表达,双向调控免疫平衡。
激活 GITR 削弱调节性 T 细胞免疫抑制,增强抗肿瘤 CD8⁺T 杀伤能力,是热门免疫检查点靶点。
肿瘤免疫联合治疗、自身免疫病免疫平衡调控、移植排斥研究核心受体。
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核心实验操作方法

1. Western Blot(WB)
抗体孵育
一抗孵育:用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度(如1:1000),4℃摇床缓慢孵育过夜;或室温孵育1-2小时,孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。
洗涤:用TBST缓冲液洗涤3次,每次5分钟,洗去未结合的一抗;加入HRP标记二抗(1:5000-1:10000稀释),室温孵育1小时。
显影:再次洗涤后,加入ECL发光液孵育1-2分钟,用化学发光成像仪采集图像,根据信号强度调整曝光时间。
2. 免疫组化(IHC)
抗体孵育
一抗孵育:滴加稀释后的一抗(如1:200)于组织切片上,置于湿盒中4℃孵育过夜;次日室温复温30分钟,PBS冲洗3次,每次5分钟。
二抗结合:加入生物素标记二抗(1:200)室温孵育30分钟,PBS冲洗后加入ABC复合物(1:100)室温孵育30分钟。
显色封片:DAB显色剂显色3-10分钟(显微镜下观察控制时间),苏木素复染1分钟,梯度乙醇脱水后中性树胶封片。
3. 免疫荧光(IF)
抗体孵育
一抗孵育:用5% BSA稀释抗体至工作浓度(如1:100),滴加在细胞爬片上,4℃避光孵育过夜;室温复温后PBS冲洗3次,每次5分钟。
二抗结合:加入荧光标记二抗(如FITC标记抗兔IgG,1:200),室温避光孵育30-60分钟;PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。
观察:荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察,激发波长根据二抗标记物选择(如FITC为488nm)。
4. ELISA实验
包被与孵育
包被:用包被缓冲液(pH9.6碳酸盐缓冲液)稀释抗原至1-10μg/ml,每孔加入100μl,4℃过夜孵育。
封闭与一抗孵育:弃去包被液,PBST洗涤3次,加入5% BSA封闭液200μl/孔,37℃孵育1小时;加入稀释后的一抗100μl/孔,37℃孵育1-2小时或4℃过夜。
检测:洗涤后加入酶标二抗(1:5000),37℃孵育1小时;TMB底物溶液显色10-30分钟,2M硫酸终止反应后,酶标仪450nm波长读取OD值。
关键字: 糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体抗体;Rabbit;24 kDa;
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