产品属性

产品名称 | 腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 | 货号 | YS-K7607 |
英文名称 | AMPK alpha-1 Rabbit pAb | 用途 | 仅供科研实验 |
商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:AMPK alpha-1; 5 AMP activated protein kinase alpha 1catalytic subunit; 5 AMP activated protein kinase catalytic alpha 1 chain; 5' AMP activated protein kinase catalytic subunit alpha 1; AAPK1; acetyl CoA carboxylase kinase; AI194361; AI450832; AL024255; AMP-activate kinase alpha 1 subunit; AMP-activated protein kinase, catalytic, alpha-1; AMPK 1; AMPK alpha 1 chain; AMPK; AMPK1; AMPKa1; AMPKalpha1; C130083N04Rik; cb116; EC 2.7.11.1; HMG CoA reductase kinase; hormone sensitive lipase kinase; im:7154392; kinase AMPK alpha1; MGC33776; MGC57364; PRKAA 1; PRKAA1; Protein kinase AMP activated alpha 1 catalytic subunit; SNF1-like protein AMPK; wu:fa94c10; AAPK1_HUMAN; AMPKα1; AMPK α1; AMPKα 1; AMPK α 1; AMPK AMPK-α1; AMPK-α-1; α-1; AMPK-a; AMPK a1.
交叉反应:Human
抗体来源:Rabbit
免疫原:Recombinant human AMPK alpha-1 protein
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量:64 kDa
浓度:1mg/ml
储存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特点

靶向AMPK α1催化亚基,是细胞能量代谢的核心调控激酶。它被LKB1或CaMKKβ磷酸化激活,调控mTOR、ACC等下游效应分子。该抗体用于研究代谢重编程、肿瘤代谢和线粒体生物发生。
靶点背景

AMPKα1 为催化亚基,Thr172 磷酸化位点是活性检测核心位点。
调控全身代谢稳态,免疫细胞能量重编程依赖 α1 信号。
衰老、肥胖模型中 AMPKα1 活性普遍降低,提升活性可改善代谢损伤。
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核心实验操作方法

1. Western Blot(WB)
抗体孵育
一抗孵育:用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度(如1:1000),4℃摇床缓慢孵育过夜;或室温孵育1-2小时,孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。
洗涤:用TBST缓冲液洗涤3次,每次5分钟,洗去未结合的一抗;加入HRP标记二抗(1:5000-1:10000稀释),室温孵育1小时。
显影:再次洗涤后,加入ECL发光液孵育1-2分钟,用化学发光成像仪采集图像,根据信号强度调整曝光时间。
2. 免疫组化(IHC)
抗体孵育
一抗孵育:滴加稀释后的一抗(如1:200)于组织切片上,置于湿盒中4℃孵育过夜;次日室温复温30分钟,PBS冲洗3次,每次5分钟。
二抗结合:加入生物素标记二抗(1:200)室温孵育30分钟,PBS冲洗后加入ABC复合物(1:100)室温孵育30分钟。
显色封片:DAB显色剂显色3-10分钟(显微镜下观察控制时间),苏木素复染1分钟,梯度乙醇脱水后中性树胶封片。
3. 免疫荧光(IF)
抗体孵育
一抗孵育:用5% BSA稀释抗体至工作浓度(如1:100),滴加在细胞爬片上,4℃避光孵育过夜;室温复温后PBS冲洗3次,每次5分钟。
二抗结合:加入荧光标记二抗(如FITC标记抗兔IgG,1:200),室温避光孵育30-60分钟;PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。
观察:荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察,激发波长根据二抗标记物选择(如FITC为488nm)。
4. ELISA实验
包被与孵育
包被:用包被缓冲液(pH9.6碳酸盐缓冲液)稀释抗原至1-10μg/ml,每孔加入100μl,4℃过夜孵育。
封闭与一抗孵育:弃去包被液,PBST洗涤3次,加入5% BSA封闭液200μl/孔,37℃孵育1小时;加入稀释后的一抗100μl/孔,37℃孵育1-2小时或4℃过夜。
检测:洗涤后加入酶标二抗(1:5000),37℃孵育1小时;TMB底物溶液显色10-30分钟,2M硫酸终止反应后,酶标仪450nm波长读取OD值。
关键字: 腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体;64 kDa;Rabbit;
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