基因敲除技术,可精准地去除或失活特定基因。构建基因敲除的细胞模型,可揭示基因在生物体中的功能,并在药物靶点筛选、药物开发等领域有广泛的应用。现有的基因编辑工具有CRISPR/Cas9、TALENs或ZFNs等。目前,CRISPR/Cas9系统因其高效性和操作便捷性,已成为基因敲除的首选工具。该系统通过gRNA引导Cas9核酸酶,对目标DNA进行特异性的识别和切割,产生DNA双链断裂(DSB)。随后,细胞通过非同源末端连接(NHEJ)途径修复这些双链断裂。在修复过程中,常常会产生非三倍数的插入或缺失(indel),导致移码突变,进而实现基因敲除。
一、服务详情
细胞类型
各种细胞类型,包括肿瘤、常规、干细胞、原代和永生化细胞系。
服务类型
单基因敲除/多基因敲除/移码突变/片段敲除
交付标准
基因敲除单克隆细胞≥1株(2管细胞/株,1×106/管)
周期/价格
快至4周,请询价
二、服务类型
根据客户需求、并综合基因和细胞等情况,设计基因敲除方案。
单基因敲除
实现单个基因的有效敲除
多基因敲除
实现多个基因的有效敲除
移码突变
针对编码基因的编码区前端设计sgRNA,实现碱基非3的倍数的indel
片段敲除
针对基因设计sgRNA,实现基因片段的删除
附:
1. 移码突变
通过在靶位点引入小的插入/缺失(indels)以破坏开放阅读框,诱导提前终止密码子的生成,导致功能蛋白表达丧失。
通过单点编辑构建完全功能缺失模型的理想选择
2. 片段敲除
精确删除较大片段的基因组区域(通常为数百至数千个碱基对),以移除基因中的关键外显子或功能结构域。
适用于去除关键功能区域,从而实现基因失活,并用于研究结构域特异性的功能影响
3. 双基因敲除
在同一细胞系或生物体内同时敲除两个基因。该方法用于研究基因间的相互作用、功能冗余或代偿机制。
通过同时靶向多个基因,有助于解析复杂的生物学网络
三、联系方式
电话:13155297675(企业微信同号) | 邮箱:wuhan_institute@elevin.cn
官网:www.laierwen.com
来尔文(武汉)生物医药研究院
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