大鼠N-乙酰转移酶2(NAT2)重组蛋白进行外源物芳香胺乙酰化代谢酶活检测,药物代谢、致癌物解毒、个体化代谢分型体外药理实验。
型号:YS-DB1594
产品名称:大鼠N-乙酰转移酶2(NAT2)重组蛋白
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名称:Recombinant N-Acetyltransferase 2 (NAT2)
AAC2; PNAT; Arylamine N-Acetyltransferase; Arylamide acetylase 2; Polymorphic arylamine N-acetyltransferase
酶与激酶
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::细胞质
预测分子量:60.3kDa
实际分子量:60kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Asp20~Val280 with N-terminal His and GST Tag
缓冲液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:5.1
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

SDS-PAGE 纯度分析:电泳判断条带纯度、杂蛋白、蛋白降解
BCA 定量检测:铜离子还原显色,分光法测算重组蛋白浓度
乙酰转移酶活:乙酰 CoA 介导底物乙酰化,产物定量表征 N - 乙酰转移酶催化活性
WB 免疫鉴定:NAT2 特异性抗体杂交,验证重组蛋白产物无误
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常见实验场景操作指南:

细胞培养实验
浓度优化:先设置预实验梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况,确定最优工作浓度。
添加时机:细胞接种后24-48小时,待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基:若蛋白半衰期较短,需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置:在ELISA或WB实验中,用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线,确保定量准确性。
封闭处理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭,降低非特异性结合。
抗体配对:选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体,避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择:若使用Pull-down实验,优先选择GST或His标签的重组蛋白,便于亲和层析分离。
反应条件:在生理缓冲液(如PBS)中进行,温度控制在4℃,避免蛋白变性。
阴性对照:设置不含目标蛋白的对照组,排除标签非特异性结合的干扰。
关键字: 大鼠N-乙酰转移酶2;NAT2;重组蛋白;
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