大鼠丙酮酸脱氢酶激酶同工酶1(PDK1)重组蛋白用于丙酮酸脱氢酶磷酸化抑制活性测定、糖脂代谢重编程、肿瘤代谢与胰岛素抵抗研究实验。
型号:YS-DB1976
产品名称:大鼠丙酮酸脱氢酶激酶同工酶1(PDK1)重组蛋白
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名称:Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 1 (PDK1)
[Pyruvate dehydrogenase (acetyl-transferring)] kinase isozyme 1, mitochondrial
酶与激酶
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::线粒体
预测分子量:29.6kDa
实际分子量:30kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Val172~Pro399 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:7.9
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

纯度检测(SDS-PAGE):电泳染色评估蛋白纯度,排查降解片段;
分子量验证:条带位置比对 Marker,核对 PDK1 理论分子量;
浓度定量(BCA 比色):肽键还原铜离子显色,定量样品蛋白浓度;
激酶活性检测:ATP 依赖磷酸化丙酮酸脱氢酶靶蛋白,磷酸化水平免疫检测表征激酶催化活性。
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不同实验场景使用方法:

1. 细胞实验(细胞刺激、增殖、分化、趋化)
用无血清培养基或基础培养基稀释蛋白至工作浓度
按所需终浓度直接加入细胞培养体系
现配现用,避免室温长时间放置降解
设置空白对照组、溶剂对照组
2. 体外酶活 / 结合实验(蛋白互作、ELISA、SPR、酶动力学)
用匹配 pH、离子强度反应缓冲液稀释
冰上配制,全程低温减少降解
按体系体积依次加样,启动反应,设置阴性对照
3. 动物体内注射(尾静脉、腹腔、皮下给药)
复溶后透析置换为无菌生理盐水 / PBS,去除缓冲盐、防腐剂
0.22 μm 过滤除菌,无菌分装
根据动物体重计算给药剂量,现配现用
4. 蛋白免疫(制备抗体)
蛋白与佐剂等体积混匀乳化
多点皮下或肌肉注射免疫动物,按免疫程序加强免疫
5. WB / 标准品、校准品使用
稀释成梯度浓度,上样做标准曲线或阳性对照
关键字: 大鼠丙酮酸脱氢酶激酶同工酶1;PDK1;重组蛋白;
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