大鼠蛋白激酶Cα(PKCa)重组蛋白用于 PKCα 亚型激酶活性测定、磷脂依赖信号通路、细胞分化凋亡及肿瘤发生相关机理研究实验。
型号:YS-DB547
产品名称:大鼠蛋白激酶Cα(PKCa)重组蛋白
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名称:Recombinant Protein Kinase C Alpha (PKCa)
PRKCA; PKC-A; AAG6; PKC-Alpha
信号转导
酶与激酶
神经科学
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌
预测分子量:36.2kDa
实际分子量:36kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Phe339~Phe597 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:5.4
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

纯度检测(SDS-PAGE):电泳染色判断条带纯度、杂蛋白污染;
分子量验证:条带位置比对 Marker,核对 PKCa 理论分子量;
浓度定量(BCA 比色):肽键还原铜离子显色,分光光度法定量蛋白浓度;
PKC 激酶活性检测:依赖磷脂、钙离子激活,磷酸化靶多肽底物,产物检测测定蛋白激酶催化活性。
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蛋白复溶与保存:

1. 复溶前准备
实验环境:在超净工作台内进行操作,避免污染
试剂准备:无菌水、PBS缓冲液或产品说明书指定的复溶液
工具准备:无菌移液器、枪头、离心管
2. 复溶步骤
短暂离心:将蛋白冻干粉管短暂离心(1000rpm,1min),使管壁和管盖的蛋白粉末集中到管底
加入复溶液:按照说明书推荐的体积加入无菌水或指定复溶液,轻轻吹打混匀,避免涡旋振荡防止蛋白变性
静置溶解:室温静置5-10分钟,期间可轻轻颠倒离心管帮助溶解,避免剧烈振荡
分装保存:根据实验需要将复溶后的蛋白分装成小份(如10μg/份),避免反复冻融
3. 保存条件
长期保存:-20℃或-80℃避光保存,加入50%甘油可提高稳定性
短期保存:4℃可稳定保存1-2周,需避免反复冻融
注意:
避免接触强氧化剂、强酸强碱环境
若蛋白出现沉淀或浑浊,可4℃放置或短暂离心后取上清使用
关键字: 大鼠蛋白激酶Cα;PKCa;重组蛋白;
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