大鼠线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)重组蛋白 新品

大鼠线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)重组蛋白可开展甘油三酯合成起始关键酶活性分析、线粒体甘油磷脂合成通路及脂肪堆积相关代谢研究。

型号：YS-DB934

产品名称：大鼠线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)重组蛋白

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Glycerol-3-Phosphate Acyltransferase, Mitochondrial (GPAM)

GPAT1

酶与激酶

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：n/a

预测分子量：-

实际分子量：-(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：N-terminal His Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：-

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

GPAM 特异性抗体特异性结合重组蛋白，WB 验证蛋白分子量与表达纯度。

GPAM 催化甘油 - 3 - 磷酸酰基化生成溶血磷脂酸，检测底物消耗或产物生成量表征酰基转移酶活性。

BCA 测定总蛋白浓度，校正上样差异，标准化酶活结果。

空白反应体系、内质网 GPAT 同工酶对照，排除非特异性酰基转移副反应干扰。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。