大鼠支链α-酮酸脱氢酶(BCKDK)重组蛋白用于支链 α- 酮酸脱氢酶磷酸化调控、支链氨基酸代谢失衡及代谢综合征相关酶学机制研究。
型号:YS-DB965
产品名称:大鼠支链α-酮酸脱氢酶(BCKDK)重组蛋白
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名称:Recombinant Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrogenase Kinase (BCKDK)
BCKDHKIN; 3-Methyl-2-Oxobutanoate Dehydrogenase/Lipoamide Kinase,Mitochondrial
酶与激酶
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌
预测分子量:24.5kDa
实际分子量:24kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Arg44~Thr223 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:9.0
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

BCKDK 特异性抗体靶向重组蛋白,免疫定性鉴定重组激酶蛋白。
BCKDK 磷酸化修饰支链 α- 酮酸脱氢酶复合体,检测靶蛋白磷酸化水平定量激酶活性。
BCA 总蛋白定量,归一化酶活数据。
底物空白、无关丝氨酸激酶对照,排除非特异性蛋白磷酸化干扰。
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复溶操作要点:

复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字: 大鼠支链α-酮酸脱氢酶;BCKDK;重组蛋白;
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