大鼠组织蛋白酶B(CTSB)重组蛋白用于溶酶体水解活性检测、肿瘤侵袭转移、细胞凋亡、组织重塑及蛋白酶抑制剂筛选实验。
型号：YS-DB1218
产品名称：大鼠组织蛋白酶B(CTSB)重组蛋白
物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
英文名称：Recombinant Cathepsin B (CTSB)
CTS-B; APPS; CPSB; APP secretase
酶与激酶
物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
来源：原核表达
宿主E.coli
内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位：：分泌, 溶酶体, 细胞外基质
预测分子量：23.9kDa
实际分子量：25kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签：Val129~Gln333 with N-terminal His Tag
缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性状：冻干粉
纯度：> 90%
等电点：5.7
应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：
半胱氨酸蛋白酶水解机制：CTSB 依赖巯基活化，水解羧基端精氨酸 / 赖氨酸肽键，切割荧光 / 发色多肽底物。
荧光底物灵敏检测：淬灭型荧光多肽酶切后荧光释放，荧光强度对应重组 CTSB 酶活力大小。
免疫学定量重组蛋白：特异性抗体 ELISA 定量蛋白浓度，WB 验证重组蛋白完整性与纯度。
特异性抑制剂对照：加入组织蛋白酶 B 抑制剂，扣除非特异水解，测得重组蛋白真实活性。
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复溶操作要点：
复溶前准备
工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。
缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：
基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl
保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。
缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。
静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字： 大鼠组织蛋白酶B;CTSB;重组蛋白;
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