人17-β-羟基类固醇脱氢酶3(HSD17b3)重组蛋白开展睾酮合成酶活检测、雄性性腺发育、性发育异常及激素靶向药物体外筛选实验。
型号:YS-DB783
产品名称:人17-β-羟基类固醇脱氢酶3(HSD17b3)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD17b3)
SDR12C2; EDH17B3; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 12C,Member 2; Testosterone 17-Beta-Dehydrogenase 3; Testicular 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::内质网腔
预测分子量:38.2kDa
实际分子量:33kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Met1~Arg310 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:8.9
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

酮类固醇还原催化机制:依赖 NADPH 催化雄烯二酮还原为睾酮,NADPH 消耗速率反映重组蛋白酶活性。
紫外吸光度辅酶检测:340nm NADPH 吸光度下降速率动态测定重组 HSD17b3 活性。
激素产物液相定量:睾酮产物经色谱定量,换算重组蛋白催化效率。
免疫检测蛋白纯度含量:特异性抗体验证重组蛋白表达正确,定量蛋白浓度。
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复溶操作要点:

复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字: 人17-β-羟基类固醇脱氢酶3;HSD17b3;重组蛋白;
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