人ⅣD组磷脂酶A2(PLA2G4D)重组蛋白用于花生四烯酸释放、炎症脂质介质合成、炎症免疫应答及磷脂酶抑制剂体外筛选实验。
型号:YS-DB21
产品名称:人ⅣD组磷脂酶A2(PLA2G4D)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D)
cPLA2delta; Cytosolic phospholipase A2 delta
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::n/a
预测分子量:42.8kDa
实际分子量:43kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Pro9~Leu120 with N-terminal His and GST Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

磷脂 sn-2 酯键特异性水解:PLA2G4D 切割磷脂二位酯键,释放游离脂肪酸与溶血磷脂,产物量测酶活。
荧光磷脂底物检测:荧光修饰磷脂酶切后荧光释放,荧光强度定量重组蛋白酶活力。
游离脂肪酸比色定量:脂肪酸显色反应测吸光度,换算重组 PLA2G4D 活性单位。
免疫鉴定重组蛋白纯度:特异性抗体验证蛋白表达、分子量与杂蛋白占比。
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复溶操作要点:

复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字: 人ⅣD组磷脂酶A2;PLA2G4D;重组蛋白;
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