人丙酮酸羧化酶(PC)重组蛋白 新品

人丙酮酸羧化酶(PC)重组蛋白用于 PC 羧化酶活性动力学检测、糖异生代谢通路研究、肝脏糖代谢调控机制分析、调节剂筛选与特异性抗体制备鉴定。

型号：YS-DB1691

产品名称：人丙酮酸羧化酶(PC)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Pyruvate Carboxylase (PC)

PCB

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：线粒体

预测分子量：53.6kDa

实际分子量：54kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Pro36~Glu486 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：6.2

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

Western Blot 分子量与特异性鉴定：抗体杂交匹配理论分子量，验证蛋白表达正确。

BCA 法精准浓度测定：铜离子显色反应准确定量蛋白浓度。

羧化酶酶活检测：依赖 ATP、生物素催化丙酮酸羧化生成草酰乙酸，偶联显色体系检测产物表征酶活。

内毒素比色法定量检测：控制内毒素水平适配细胞代谢研究。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。