人丙酮酸脱氢酶α2(PDHa2)重组蛋白可开展脱氢酶活性测定、三羧酸循环代谢调控研究、线粒体能量代谢机理探究、互作复合物验证及酶抑制剂筛选试验。
型号：YS-DB2945
产品名称：人丙酮酸脱氢酶α2(PDHa2)重组蛋白
物种：Homo sapiens (Human，人)
英文名称：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha 2 (PDHa2)
PDHAL; Lipoamide; Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, testis-specific form, mitochondrial
酶与激酶
物种：Homo sapiens (Human，人)
来源：原核表达
宿主E.coli
内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位：：线粒体
预测分子量：43.6kDa
实际分子量：44kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签：Ser28~Ser388 with N-terminal His Tag
缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性状：冻干粉
纯度：> 80%
等电点：7.6
应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：
SDS-PAGE 纯度灰度分析：电泳分离蛋白组分，统计目标蛋白纯度。
280nm 紫外快速定量浓度：快速粗测蛋白含量。
脱氢酶活性检测：催化丙酮酸氧化脱羧，偶联 NAD⁺还原生成 NADH，340nm 吸光度上升速率计算酶活。
宿主 DNA 荧光定量残留检测：消除核酸杂质干扰。
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复溶操作要点：
复溶前准备
工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。
缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：
基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl
保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。
缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。
静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字： 人丙酮酸脱氢酶α2;PDHa2;重组蛋白;
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