人蛋白二硫化物异构酶A5(PDIA5)重组蛋白用于 PDIA5 氧化还原异构酶活性表征、内质网蛋白稳态调控研究、错误折叠蛋白降解机制、互作蛋白筛选及抗体制备鉴定。
型号:YS-DB740
产品名称:人蛋白二硫化物异构酶A5(PDIA5)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Protein Disulfide Isomerase A5 (PDIA5)
PDI-A5; PDIR; Protein Disulfide Isomerase-Associated 5; Protein disulfide isomerase-related protein
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::n/a
预测分子量:18.8kDa
实际分子量:18.8kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Trp378~Glu506 with
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

Western Blot 靶向验证:PDIA5 特异性抗体识别目标条带,确认蛋白构建表达正确。
BCA 法精准浓度测定:铜显色体系准确定量蛋白浓度。
二硫键修饰酶活检测:体外蛋白复性体系,对比底物折叠效率,表征 PDIA5 异构酶催化活性。
内毒素比色法定量检测:适配蛋白折叠机制研究实验。
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常见实验场景操作指南:

细胞培养实验
浓度优化:先设置预实验梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况,确定最优工作浓度。
添加时机:细胞接种后24-48小时,待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基:若蛋白半衰期较短,需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置:在ELISA或WB实验中,用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线,确保定量准确性。
封闭处理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭,降低非特异性结合。
抗体配对:选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体,避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择:若使用Pull-down实验,优先选择GST或His标签的重组蛋白,便于亲和层析分离。
反应条件:在生理缓冲液(如PBS)中进行,温度控制在4℃,避免蛋白变性。
阴性对照:设置不含目标蛋白的对照组,排除标签非特异性结合的干扰。
关键字: 人蛋白二硫化物异构酶A5;PDIA5;重组蛋白;
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