人蛋白磷酸酶1催化亚基α亚型(PPP1Ca)重组蛋白

人蛋白磷酸酶1催化亚基α亚型(PPP1Ca)重组蛋白用于体外磷酸酶活性分析、底物去磷酸化实验、细胞周期与凋亡调控相关生化机理研究。

型号：YS-DB2332

产品名称：人蛋白磷酸酶1催化亚基α亚型(PPP1Ca)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Protein Phosphatase 1, Catalytic Subunit Alpha Isoform (PPP1Ca)

PPP1C-A; PPP1-CA; PP-1A; PPP1A; Serine/Threonine-Protein Phosphatase PP1-Alpha Catalytic Subunit

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞核, 细胞质

预测分子量：41.1kDa

实际分子量：41kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ser2~Lys330 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：5.9

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

Western Blot 鉴定：PPP1Ca 特异性抗体特异性识别重组蛋白，条带分子量匹配理论值，验证蛋白表达正确性。

SDS-PAGE 纯度分析：电泳分离杂蛋白组分，染色灰度统计目标蛋白占比，评估蛋白纯化纯度。

BCA 法蛋白浓度定量：肽键还原 Cu²⁺显色，OD 值对标 BSA 标准曲线，精准测定蛋白浓度。

丝氨酸 / 苏氨酸磷酸酶活性检测：以磷酸化丝 / 苏氨酸多肽为底物，PPP1Ca 催化脱磷酸，检测底物去磷酸化速率判定酶活。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。