人羧肽酶A4(CPA4)重组蛋白适用于多肽 C 端精氨酸 / 赖氨酸剪切活性分析、肿瘤微环境重塑、细胞增殖侵袭体外酶学研究实验。
型号：YS-DB793
产品名称：人羧肽酶A4(CPA4)重组蛋白
物种：Homo sapiens (Human，人)
英文名称：Recombinant Carboxypeptidase A4 (CPA4)
酶与激酶
物种：Homo sapiens (Human，人)
来源：原核表达
宿主E.coli
内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位：：分泌
预测分子量：44.9kDa
实际分子量：45kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签：Lys55~Tyr421 with N-terminal His Tag
缓冲液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性状：冻干粉
纯度：> 97%
等电点：6.0
应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
检测原理：
C 端芳香族氨基酸水解活性检测：CPA 家族切除多肽 C 端疏水 / 芳香族氨基酸，荧光多肽底物水解产生可检测信号，定量羧肽酶活性。
特异性抗体免疫定量：抗 CPA4 特异性抗体避免 CPA1/2/3 亚型交叉反应，ELISA 显色定量重组蛋白总量。
免疫电泳纯度鉴定：SDS-PAGE 分离蛋白，免疫印迹确认目的条带，评估纯化纯度与蛋白降解。
金属离子依赖性验证：CPA4 活性依赖锌离子，螯合剂去除锌后酶活显著下降，佐证酶源为目标羧肽酶。
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常见实验场景操作指南：
细胞培养实验
浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。
添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。
封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。
抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。
反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。
阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。
关键字： 人羧肽酶A4;CPA4;重组蛋白;
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