人肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅰ(PADI1)重组蛋白

人肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅰ(PADI1)重组蛋白用于蛋白精氨酸瓜氨酸化修饰体外酶活测定、上皮角质形成、皮肤屏障调控表观修饰研究实验。

型号：YS-DB2367

产品名称：人肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅰ(PADI1)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Peptidyl Arginine Deiminase Type I (PADI1)

PDI; PAD1; HPAD10; PDI1; Peptidylarginine Deiminase Type I; Protein-Arginine Deiminase Type-1; hPAD-Colony 10

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞质

预测分子量：33.1kDa

实际分子量：33kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Pro298~Arg556 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：7.5

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

精氨酸瓜氨酸化酶活检测：PADI1 催化多肽精氨酸残基脱亚胺生成瓜氨酸，瓜氨酸特异性抗体定量修饰产物，测定酶活性。

亚型特异性免疫定量：PADI1 专属抗体不交叉识别 PADI2/3/4/6，ELISA 显色定量重组蛋白含量。

免疫电泳纯度鉴定：SDS-PAGE 转膜杂交，特异性条带验证蛋白表达完整性，分析杂蛋白污染。

钙离子依赖性活性佐证：PADI 家族活性依赖钙离子螯合激活，去除钙离子后酶活丧失，反向确认目标蛋白酶信号。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。