人异戊酰辅酶A脱氢酶(IVD)重组蛋白适用于支链氨基酸分解代谢通路研究、枫糖尿症致病机制探究、线粒体脂肪酸氧化酶活测定实验。
型号:YS-DB2452
产品名称:人异戊酰辅酶A脱氢酶(IVD)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Isovaleryl Coenzyme A Dehydrogenase (IVD)
ACAD2
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::n/a
预测分子量:29.4kDa
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Met1~Pro235 with
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

脱氢酶氧化反应:IVD 催化异戊酰辅酶 A 脱氢,生成烯脂酰辅酶 A,同时还原黄素辅因子 FAD。
人工电子受体显色:耦联人工电子受体,还原后产生可见光吸光度变化,定量酶催化速率。
免疫印迹纯度检测:标签抗体判定重组 IVD 分子量、降解情况与表达纯度。
辅因子依赖验证:去除 FAD 体系酶活大幅丧失,证明重组蛋白具备天然辅因子依赖特性。
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复溶操作要点:

复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字: 人异戊酰辅酶A脱氢酶;IVD;重组蛋白;
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