人转谷氨酰胺酶6(TGM6)重组蛋白参与蛋白谷氨酰胺交联修饰研究、皮肤角质层分化机制、神经退行性疾病相关酶活功能分析实验。
型号:YS-DB894
产品名称:人转谷氨酰胺酶6(TGM6)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Transglutaminase 6 (TGM6)
TGM3L; TGY; SCA35; Transglutaminase 3-Like; Spinocerebellar Ataxia 35; Transglutaminase Y; Protein-glutamine gamma-glutamyltransferase 6
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::细胞质
预测分子量:18.9kDa
实际分子量:18kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Thr292~Arg422 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:4.4
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

谷氨酰胺交联催化:TGM6 催化蛋白谷氨酰胺残基与赖氨酸氨基发生转酰胺交联反应。
荧光交联底物定量:可交联荧光底物聚合后荧光信号变化,表征转谷氨酰胺酶活性。
WB 标签检测重组蛋白分子量与纯度。
钙离子依赖验证:该酶活性依赖 Ca²⁺,螯合钙离子后酶活显著降低,匹配天然酶生化特性。
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常见实验场景操作指南:

细胞培养实验
浓度优化:先设置预实验梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况,确定最优工作浓度。
添加时机:细胞接种后24-48小时,待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基:若蛋白半衰期较短,需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置:在ELISA或WB实验中,用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线,确保定量准确性。
封闭处理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭,降低非特异性结合。
抗体配对:选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体,避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择:若使用Pull-down实验,优先选择GST或His标签的重组蛋白,便于亲和层析分离。
反应条件:在生理缓冲液(如PBS)中进行,温度控制在4℃,避免蛋白变性。
阴性对照:设置不含目标蛋白的对照组,排除标签非特异性结合的干扰。
关键字: 人转谷氨酰胺酶6;TGM6;重组蛋白;
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