商品属性:
产品名称 | 白蛋白含量测试盒 | 货号 | YSH3254 |
规格 | 100管/96样、50管/48样 | 检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
商品介绍:
白蛋白由肝实质细胞合成,在血浆蛋白中含量最多,具有重要的生理功能,包括维持胶体渗透压,并可与长链脂肪酸、胆汁酸、胆红素、血红素、钙和镁离子等物质结合。它拥有抗氧化性和抗凝血性,能充当营养物质和药物的运输载体,同时也是血浆PH值的缓冲剂。血清白蛋白含量直接关系到肝脏疾病、肾脏疾病、营养不良或蛋白流失性肠道病症的发生发展,是临床检测的一个重要指标。
测定原理
白蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷,可与带负电荷的染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色复合物,在波长630nm处有吸收峰,在一定范围内其颜色深浅与白蛋白浓度成正比例。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
检测原理:
pH 缓冲环境:反应体系维持 pH‑4.2 左右弱酸缓冲环境。
特异性结合显色:白蛋白可与溴甲酚绿染料快速结合,生成蓝绿色复合物;球蛋白几乎不发生反应。
可见光比色检测:复合物在 628 nm 波长下测定吸光度,吸光度和白蛋白含量成正比。
对照定量:使用白蛋白标准品绘制曲线,扣除试剂空白,计算样本白蛋白浓度。
样本前处理方法:
植物组织样本取样:称取0.1g样本,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆离心:11000g,4℃离心10min,弃沉淀取上清,置冰上待测
血清/血浆样本采集:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20°C,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻处理:直接检测。
细胞/微生物样本收集:先收集微生物或细胞到离心管内,离心后弃上清破碎:按照微生物或细胞数量(10⁴个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万微生物或细胞加入1mL提取液),超声波破碎微生物或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次)离心:8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测
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测定操作步骤:
标准曲线绘制:
取6支试管,分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL标准系列溶液,补加提取液至1mL。
每管加入2mL底物缓冲液,37℃水浴预热5分钟。
加入0.5mL显色剂,混匀后37℃水浴准确反应10分钟。
立即加入2mL终止液终止反应,于405nm波长下测定吸光度,以标准品浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
样本检测:
取1mL待测样本(若样本活性过高,需用提取液稀释),加入2mL底物缓冲液,37℃水浴预热5分钟。
加入0.5mL显色剂,混匀后37℃水浴准确反应10分钟。
立即加入2mL终止液终止反应,于405nm波长下测定吸光度,根据标准曲线计算样本中β-GAL活性。
微量酶标仪法操作步骤
加样:在96孔板中设置空白孔、标准孔、样本孔,每孔加50μL对应溶液。
反应:每孔加入100μL底物缓冲液,37℃孵育30分钟。
终止:每孔加入50μL终止液。
读数:用酶标仪在405nm波长下测定吸光度,计算酶活性。
关键字: 白蛋白;含量测试盒;
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