碱性蛋白酶测试盒
产品介绍：
AKP是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类，属于丝氨酸蛋白酶。此外，该酶还能够水解酯键、酰胺键，具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一，广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。
测定原理：
在碱性条件下，AKP水解酪蛋白生成酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸生成钨蓝；钨蓝在680nm有特征吸收峰，测定680nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。
自备仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、0.5 mL EP管和蒸馏水。
产品名称 | 碱性蛋白酶测试盒 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 |
检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
分类 | 蛋白酶系列 |
货号 | YSH3337 |
检测原理：
碱性环境酶促水解：碱性蛋白酶在最适碱性 pH 条件下，水解酪蛋白底物，生成可溶性小分子酪氨酸类水解产物。
三氯乙酸终止反应：反应到达设定时间，加入三氯乙酸沉淀剩余大分子底物，终止酶促反应。
福林酚显色反应：上清液中水解产物酪氨酸在碱性环境还原福林酚试剂，产生蓝色物质。
比色算活力：680 nm 测吸光度；以酪氨酸标准曲线定量水解产物，换算碱性蛋白酶活力。
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操作步骤：
操作仪器预热：将可见分光光度计预热30min，调节波长至540nm，用蒸馏水调零标准曲线绘制：
取6支具塞刻度试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL葡萄糖标准液（10mg/mL）
用蒸馏水补至1.0mL，再加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min
立即用流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值
以葡萄糖浓度（mg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线样本测定：
试剂名称(μL) 空白管 测定管
提取液/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
混匀后37℃水浴30min，立即加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min
流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值A空白和A测定
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