商品属性:
产品名称 | 淀粉含量测试盒 | 货号 | YSH3280 |
规格 | 100管/96样、50管/48样 | 检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
商品介绍:
淀粉是植物中糖的主要储存形式,其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。
测定原理:
利用80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,进一步采用酸水解法分解淀粉为葡萄糖,采用蒽酮比色法测定葡萄糖含量,即可计算淀粉含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、浓硫酸(不允许快递)、研钵和蒸馏水。
检测原理:
样本先用 80% 乙醇加热去除可溶性糖,避免可溶性糖对后续淀粉测定产生干扰。
沉淀下来的淀粉在强酸(高氯酸)或者淀粉酶作用下水解,全部降解生成葡萄糖单体。
葡萄糖为还原糖,与 DNS 试剂加热显色,生成橙红色产物,540 nm 检测吸光度。
使用葡萄糖标准曲线换算水解产生的葡萄糖总量,再乘以淀粉‑葡萄糖换算系数得到淀粉含量。
样本前处理方法:
一、组织样本
离体后立即液氮速冻,取0.1g新鲜组织按1:10比例加入预冷提取液。
冰浴条件下充分匀浆,超声破碎30次(功率20%,超声3s/间隔10s)。
8000g 4℃离心10min,取澄清上清置于冰上待测。
二、细胞/细菌样本
收集500万~1000万细胞,弃去培养基后加入1mL预冷提取液。
冰浴超声破碎,8000g 4℃离心10min,取上清待测。
三、液体样本
血清/血浆样本按1:10比例加入提取液,沸水浴振荡提取10min。
10000g常温离心10min,取上清冷却后待测。
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测定操作步骤:
操作仪器预热:将可见分光光度计预热30min,调节波长至540nm,用蒸馏水调零标准曲线绘制:
取6支具塞刻度试管,分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL葡萄糖标准液(10mg/mL)
用蒸馏水补至1.0mL,再加入2.0mL显色工作液,沸水浴5min
立即用流水冷却至室温,定容至25mL,摇匀后测定540nm处吸光值
以葡萄糖浓度(mg/mL)为横坐标,吸光值为纵坐标绘制标准曲线样本测定:
试剂名称(μL) 空白管 测定管
提取液/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
混匀后37℃水浴30min,立即加入2.0mL显色工作液,沸水浴5min
流水冷却至室温,定容至25mL,摇匀后测定540nm处吸光值A空白和A测定
关键字: 淀粉;含量测试盒;
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