商品属性：
产品名称 | 果胶酶测试盒 | 货号 | YSH3310 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 | 检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
商品介绍：
果胶酶（pectinase）是一类分解果胶质酶类的总称，包括原果胶酶，果胶酯酶，多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类，广泛存在于植物果实和微生物中，主要用于食品、酿酒、环保、医药、纺织及日化用品行业。
测定原理：
果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸，具有还原性醛基，与DNS试剂反应生成红棕色物质，在540nm有特征吸收峰，测定540nm处吸光值变化可计算得果胶酶活性。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
检测原理：
多酶协同底物降解：果胶酶包含 PG、果胶裂解酶、果胶酯酶，共同降解果胶大分子，释放还原型半乳糖醛酸。
DNS 还原显色：生成的还原糖与 DNS 试剂加热显色，产生棕红色产物。
光度检测：540 nm 测定吸光值，还原糖产量与果胶酶总活力成正比。
酶活换算：以单位时间分解果胶产生 1 μg 半乳糖醛酸定义酶活力单位。
样本前处理方法：
一、组织样本
离体后立即液氮速冻，取0.1g新鲜组织按1:10比例加入预冷提取液。
冰浴条件下充分匀浆，超声破碎30次（功率20%，超声3s/间隔10s）。
8000g 4℃离心10min，取澄清上清置于冰上待测。
二、细胞/细菌样本
收集500万~1000万细胞，弃去培养基后加入1mL预冷提取液。
冰浴超声破碎，8000g 4℃离心10min，取上清待测。
三、液体样本
血清/血浆样本按1:10比例加入提取液，沸水浴振荡提取10min。
10000g常温离心10min，取上清冷却后待测。
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测定操作步骤：
操作仪器预热：将可见分光光度计预热30min，调节波长至540nm，用蒸馏水调零标准曲线绘制：
取6支具塞刻度试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL葡萄糖标准液（10mg/mL）
用蒸馏水补至1.0mL，再加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min
立即用流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值
以葡萄糖浓度（mg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线样本测定：
试剂名称(μL) 空白管 测定管
提取液/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
混匀后37℃水浴30min，立即加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min
流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值A空白和A测定
关键字： 果胶酶;测试盒;
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