商品属性:
产品名称 | 土壤有机碳(SOC)含量测试盒 | 货号 | YSH3458 |
规格 | 50管/48样 | 检测方法 | 光度法 |
商品介绍:
土壤有机碳(Soil organic carbon, SOC)概念是指通过微生物作用所形成的腐殖质、动植物残体和微生物体中的碳元素含量,即为土壤有机碳(SOC)。
土壤有机碳根据微生物可利用程度分为易分解有机碳,难分解有机碳和惰性有机碳。易分解者有较高的生物利用率与损失率,难分解者则有较高的残留率,一般占土壤有机质的60%~80%。且有相当多的部分参加到腐殖质的形成作用中去。
测定原理
有机碳光度法是以硫酸亚铁为标准溶液,将容量法的滴定手段改为光度测定手段,进行土壤有机质585 nm 处比色的测定,光度法测定土壤中的有机碳具有设备简单、 操作简便 、 测定结果准确等特点 ,特别适合大批样品的快速测定。
需自备的仪器和用品
天平、研钵、离心机、消解仪、浓硫酸
检测原理:
氧化消解原理:在加热、浓硫酸‑重铬酸钾强氧化条件下,土壤中有机碳被重铬酸钾‑硫酸体系氧化为二氧化碳;重铬酸根 (Cr⁶⁺) 被还原生成绿色 Cr³⁺离子。
颜色生成原理:反应后溶液中 Cr³⁺产生特征绿色,有机碳含量越高,被还原生成 Cr³⁺越多,溶液颜色越深。
分光比色定量原理:于 585‑590 nm 波长测定反应液吸光度;用葡萄糖或者标准碳源梯度氧化绘制标准曲线,计算被氧化有机碳量。
校正系数换算原理:设置空白消解管扣除试剂本底;乘以氧化校正系数(部分难氧化有机质不能被完全氧化),换算得到土壤有机碳干重含量。
样本前处理方法:
血清/血浆样本采集:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20°C,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻处理:直接检测。
植物组织样本取样:称取0.1g样本,加入1mL提取液,研磨成匀浆提取:80℃水浴30min,期间振荡2-3次离心:8000g 4℃离心10min,取上清,用提取液定容至10mL,待测
食品/饲料样本取样:称取0.1g样本,加入1mL提取液,研磨成匀浆提取:80℃水浴30min,期间振荡2-3次离心:8000g 4℃离心10min,取上清,用提取液定容至10mL,待测
细胞/微生物样本收集:先收集微生物或细胞到离心管内,离心后弃上清破碎:按照微生物或细胞数量(10⁴个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万微生物或细胞加入1mL提取液),超声波破碎微生物或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次)离心:8000g 4℃离心10min,取上清,待测
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测定操作步骤:
操作仪器预热:可见分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长到620nm和510nm,蒸馏水调零标准曲线绘制:
直链淀粉标准曲线:将直链淀粉标准品稀释成0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL系列浓度,各取0.1mL,加入0.9mL碘试剂,摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值,绘制标准曲线
支链淀粉标准曲线:将支链淀粉标准品稀释成0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL系列浓度,各取0.1mL,加入0.9mL碘试剂,摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值,绘制标准曲线样本测定:取0.1mL待测样本,加入0.9mL碘试剂,摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值
ELISA法操作试剂准备:将试剂盒从冷藏环境中取出,室温平衡15-30分钟;将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样:
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃
设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加温育:除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)显色:每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min终止:每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算:绘制标准曲线,按曲线方程计算样本浓度
关键字: 土壤有机碳;SOC;测试盒;
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