产品基础信息
一抗核心标识:
宿主物种(兔源/鼠源/羊源等)、克隆类型(单抗/多抗)
亚型(如鼠单抗IgG1、兔多抗IgG)
免疫原信息:
免疫原类型(全长蛋白、重组蛋白片段、合成多肽等)
免疫原序列、修饰类型(如磷酸化Ser473位点)
技术参数:
浓度(如1mg/mL)、纯度(SDS-PAGE或HPLC验证,通常>90%)
特异性验证结果(如WB单一条带、IHC阳性定位)
交叉反应性(明确可检测的物种,如人/小鼠/大鼠)
产品性能与适用范围
验证实验类型:明确经过验证的应用场景,包括:
WB(蛋白质印迹):推荐稀释比例(如1:1000-1:5000)、孵育条件
IHC/ICC(免疫组化/免疫细胞化学):石蜡/冰冻切片适用类型、抗原修复方法
IP/Co-IP(免疫沉淀/免疫共沉淀):推荐抗体用量、裂解液类型
ELISA/FCM(酶联免疫/流式细胞术):特殊处理要求
局限性说明:
不适用于的实验类型或样本(如某些单抗仅识别天然构象蛋白,不适合WB)
潜在交叉反应物种或蛋白(如与同源蛋白的交叉结合率)
实验操作与使用指南
一、样本处理要求
样本类型适配:
总蛋白裂解液:推荐使用RIPA裂解液,添加蛋白酶/磷酸酶抑制剂
膜蛋白/核蛋白:需使用亚细胞组分分离试剂盒制备样本
组织样本:石蜡切片需进行脱蜡、抗原修复(柠檬酸盐缓冲液或EDTA缓冲液)
禁忌提示:避免使用含NaN3的样本(抑制酶标记物活性),避免反复冻融样本
二、标准操作流程
抗体准备:
平衡至室温后离心(12000rpm,2分钟)使溶液集中于管底
按照推荐比例稀释(如1μL抗体+999μL稀释液),现用现配
孵育条件:
室温孵育1-2小时或4℃过夜孵育(推荐4℃过夜,结合更充分)
孵育时需保持样本湿润,避免干燥导致非特异性结合
洗涤步骤:
WB:使用TBST洗涤3次,每次5分钟
IHC:使用PBS洗涤3-5次,每次3分钟,减少背景染色
二抗匹配建议:
种属匹配(如兔源一抗→羊抗兔二抗)
标记物选择(HRP标记用于WB/ELISA,荧光标记用于IF/FCM)
三、结果判读与分析
阳性结果特征:
WB:预期分子量位置出现清晰单一条带(注意蛋白修饰可能导致迁移偏移)
IHC:特定细胞/组织区域出现特异性染色(如细胞核/细胞质定位)
阴性结果排查:
确认样本中目标蛋白表达水平(可通过qPCR验证mRNA表达)
检查抗体稀释比例、孵育时间是否符合要求
验证二抗活性与标记物有效性
质量控制与储存说明
一、质控标准
批次一致性验证:每批产品需进行:
SDS-PAGE纯度检测(杂带<5%)
WB特异性验证(无交叉反应杂带)
梯度稀释线性验证(信号强度与抗体浓度正相关)
稳定性测试:
加速稳定性:37℃放置7天,活性保持率>90%
长期稳定性:-20℃保存12个月,活性无显著下降
二、储存与运输
短期储存:2-8℃可保存1个月(避免反复冻融)
长期储存:-20℃分装保存,保质期通常为12-24个月
运输条件:冰袋冷藏运输,避免温度波动超过±5℃
磷酸丙糖异构酶抗体 | Alexa Fluor 647标记大鼠IgG(同型对照) | Myosin-15 Antibody Blocking Peptide |
细胞角蛋白13抗体 | Cy5标记兔IgG(同型对照) | ACTH 18-39 Antibody Blocking Peptide |
磷酸化雌激素受体ER alpha 抗体 | PE标记马IgG | A1CF Antibody Blocking Peptide |
Bax单克隆抗体 | Cy3标记猪IgG | MSTO1 Antibody Blocking Peptide |
磷酸化细胞分裂周期蛋白25C抗体 | Cy5标记羊IgG(同型对照) | GADL1 Antibody Blocking Peptide |
磷酸化CD244抗体 | Cy5标记小鼠IgG(同型对照) | cAMP-receptor protein Antibody Blocking Peptide |
富含半胱氨酸与表皮生长因子样蛋白2抗体 | 一抗PE标记狗IgG | SLC38A1 Antibody Blocking Peptide |
PSD95结合蛋白2抗体 | APC标记小鼠IgG(同型对照) | CTNNAL1 Antibody Blocking Peptide |
N-钙粘附分子抗体 | 辣根过氧物酶标记小鼠IgG | HIRIP3 Antibody Blocking Peptide |
关键字: 一抗;
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