小鼠胆碱激酶α(CHKa)重组蛋白 新品

小鼠胆碱激酶α(CHKa)重组蛋白用于磷脂酰胆碱合成代谢研究、细胞膜脂质合成、细胞增殖及脂质代谢紊乱机制实验。

型号：YS-DB2509

产品名称：小鼠胆碱激酶α(CHKa)重组蛋白

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名称：Recombinant Choline Kinase Alpha (CHKa)

CHK-A; CHK; CKI; EK; Choline Kinase; Ethanolamine kinase

信号转导

酶与激酶

代谢通路

肝胆病学

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：Cytoplasm.

预测分子量：57.5kDa

实际分子量：61kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Met1~Glu250 with N-terminal His and GST Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：6.2

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

胆碱磷酸化偶联 NADH 分光检测：CHKα 催化胆碱磷酸化生成磷酸胆碱，偶联酶体系消耗 NADH，340nm 吸光度下降速率定量激酶酶活。

特异性抗体 WB 定性验证：CHKα 抗体特异性结合重组蛋白，发光条带匹配理论分子量，确认表达产物为目标蛋白。

无机磷显色定量法：反应释放游离磷酸基团，钼酸盐显色体系生成蓝色磷钼络合物，700nm 比色测定磷酸生成量反映酶活。

SDS-PAGE 电泳纯度质控：电泳分离蛋白，考染后灰度分析计算蛋白纯度，检测降解片段与杂蛋白残留。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。