小鼠基质金属蛋白酶20(MMP20)重组蛋白适用于牙釉质发育基质降解、牙齿矿化调控、胞外基质重塑蛋白酶底物筛选实验。
型号:YS-DB2228
产品名称:小鼠基质金属蛋白酶20(MMP20)重组蛋白
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名称:Recombinant Matrix Metalloproteinase 20 (MMP20)
Enamelysin; Enamel metalloproteinase
酶与激酶
血液病学
生殖科学
发育科学
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌, 细胞外基质
预测分子量:33.0KDa
实际分子量:33kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Val137~Tyr398 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:7.0
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

抗原抗体特异性结合:采用 MMP20 特异性一抗,可精准识别重组 MMP20 氨基酸抗原表位,不与其他基质金属蛋白酶家族蛋白发生交叉结合,实现靶蛋白特异性捕获。
酶促底物水解显色定量:MMP20 具备蛋白酶水解活性,可切割特异性荧光 / 生色多肽底物,底物断裂后释放发色基团,吸光度或荧光强度与活性蛋白含量呈线性正相关。
Western blot 定性验证:蛋白电泳分离后转膜,经一抗、酶标二抗孵育,底物化学发光显影,条带位置匹配 MMP20 理论分子量,判定重组蛋白表达正确。
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常见实验场景操作指南:
细胞培养实验
浓度优化:先设置预实验梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况,确定最优工作浓度。
添加时机:细胞接种后24-48小时,待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基:若蛋白半衰期较短,需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置:在ELISA或WB实验中,用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线,确保定量准确性。
封闭处理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭,降低非特异性结合。
抗体配对:选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体,避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择:若使用Pull-down实验,优先选择GST或His标签的重组蛋白,便于亲和层析分离。
反应条件:在生理缓冲液(如PBS)中进行,温度控制在4℃,避免蛋白变性。
阴性对照:设置不含目标蛋白的对照组,排除标签非特异性结合的干扰。
关键字: 小鼠基质金属蛋白酶20;MMP20;重组蛋白;
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