小鼠亮氨酰tRNA合成酶2(LARS2)重组蛋白用于线粒体翻译过程调控、线粒体脑病、氨基酸酰化酶活性体外测定实验。
型号:YS-DB2738
产品名称:小鼠亮氨酰tRNA合成酶2(LARS2)重组蛋白
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名称:Recombinant Leucyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (LARS2)
LEURS; Leucine tRNA Ligase 2,Mitocondrial; Leucyl-tRNA synthetase
酶与激酶
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌
预测分子量:36.6kDa
实际分子量:37kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Gln609~Glu902 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:6.7
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

氨酰化焦磷酸释放显色检测:LARS2 催化亮氨酸与对应 tRNA 氨酰化,释放焦磷酸,水解产生无机磷,钼蓝比色定量酶活。
WB 特异性抗原验证:LARS2 特异性抗体识别重组蛋白,条带分子量符合理论设计。
260nm 紫外 tRNA 消耗监测:tRNA 特征紫外吸收随反应消耗下降,吸光度降幅对应氨酰化反应速率。
SDS-PAGE 灰度纯度分析:计算蛋白纯度,检测蛋白降解、杂蛋白、聚集杂质。
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复溶操作要点:

复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字: 小鼠亮氨酰tRNA合成酶2;LARS2;重组蛋白;
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