小鼠尿嘧啶核苷磷酸化酶2(UPP2)重组蛋白参与嘧啶核苷分解代谢、核苷类前药代谢活化、肿瘤化疗药物代谢研究实验。
型号:YS-DB2506
产品名称:小鼠尿嘧啶核苷磷酸化酶2(UPP2)重组蛋白
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名称:Recombinant Uridine Phosphorylase 2 (UPP2)
UPASE2; UP2; UDRPASE2
酶与激酶
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::n/a
预测分子量:39.5kDa
实际分子量:40kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Met1~Ser320 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:6.1
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

尿苷分解紫外分光检测:UPP2 水解尿苷生成尿嘧啶与核糖 - 1 - 磷酸,底物尿苷 260nm 吸光度下降速率定量酶活。
WB 特异性定性验证:UPP2 特异性抗体识别重组蛋白,条带分子量匹配理论分子量。
HPLC 底物产物分离定量:液相分离尿苷底物与尿嘧啶产物,峰面积计算核苷水解转化率。
SDS-PAGE 灰度纯度分析:电泳灰度计算纯度,监测杂蛋白、蛋白降解污染。
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复溶操作要点:

复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字: 小鼠尿嘧啶核苷磷酸化酶2;UPP2;重组蛋白;
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