小鼠血小板反应蛋白解整合素金属肽酶2(ADAMTS2)重组蛋白适用于前胶原剪切成熟、胞外基质组装、皮肤及结缔组织发育蛋白酶实验。
型号:YS-DB1454
产品名称:小鼠血小板反应蛋白解整合素金属肽酶2(ADAMTS2)重组蛋白
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名称:Recombinant A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 2 (ADAMTS2)
hPCPNI; PCINP; ADAM-TS2; NPI; Procollagen I N-Proteinase; Procollagen N-Endopeptidase; Procollagen I/II amino propeptide-processing enzyme
酶与激酶
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌, 细胞外基质
预测分子量:21.2kDa
实际分子量:22kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Val855~Pro1030 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:9.5
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

胶原多肽底物荧光水解检测:ADAMTS2 切割胶原蛋白特异性荧光多肽底物,水解后荧光信号升高定量金属蛋白酶活性。
WB 特异性免疫鉴定:ADAMTS2 特异性抗体结合重组蛋白,条带分子量匹配理论值。
SDS-PAGE 底物蛋白切割分析:完整胶原底物酶切后电泳观察降解条带,直观判定蛋白酶切割效率。
SDS-PAGE 灰度纯度分析:灰度计算重组蛋白纯度,监测杂蛋白、蛋白降解、聚集杂质。
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复溶操作要点:

复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字: 小鼠血小板反应蛋白解整合素金属肽酶2;ADAMTS2;重组蛋白;
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