商品属性：
产品名称 | 人颗粒酶A(GZMA)活性蛋白 | 型号 | YS-DB3081 |
物种 | Homo sapiens (Human，人) | 用途 | 仅供科研实验 |
型号：YS-DB3081
产品名称：人颗粒酶A(GZMA)活性蛋白
物种：Homo sapiens (Human，人)
英文名称：Active Granzyme A (GZMA)
CTLA3; HFSP; HF; H factor; Granzyme 1; Fragmentin-1; Hanukkah factor; Cytotoxic T-Lymphocyte-Associated Serine Esterase 3; CTL tryptase; Cytotoxic T-lymphocyte proteinase 1
酶与激酶
感染免疫
免疫分子
物种：Homo sapiens (Human，人)
缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性状：冻干粉
纯度：> 97%
等电点：9.2
应用：Cellculture;ActivityAssays.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
核心参数：
体外直接诱导靶细胞凋亡，用于颗粒酶胞内切割底物验证、免疫杀伤功能定量及抑制剂活性评价。
一、基础核心参数
来源：人，蛋白酶切去除前肽成熟活性型 GZMA
丝氨酸蛋白酶，具备直接底物水解活性；分子量～32 kDa；可特异性切割碱性氨基酸羧基端肽键，可检测酶活单位。
二、核心生物功能
体外构建非 caspase 凋亡体外生化模型
直接导入靶细胞可独立诱导 SET 复合体裂解、DNA 片段化，用于体外研究穿孔素 / 颗粒酶 A 凋亡通路分子机制。
蛋白酶抑制剂高通量筛选原料
用于筛选颗粒酶特异性拮抗分子，为自身免疫过度炎症、移植排斥相关药物研发提供体外筛选体系。
使用方法：
1. 蛋白复溶
解冻：从低温冰箱取出蛋白后，立即置于冰上缓慢解冻，避免室温放置导致蛋白变性。
缓冲液选择：根据蛋白特性选择合适的复溶缓冲液，常用基础缓冲液为10-50mM Tris-HCl（pH7.0-8.0）或PBS（pH7.2-7.4）；部分蛋白需添加100-300mM NaCl维持渗透压，或添加1-5mM DTT、β-巯基乙醇等还原剂保持蛋白稳定性。
复溶操作：根据蛋白浓度，加入适量缓冲液使终浓度达到0.1-1.0mg/mL（部分难溶蛋白可适当调整浓度）；轻轻颠倒离心管或用移液器缓慢吹打混匀，避免剧烈震荡；置于冰上静置10-30分钟，期间可轻柔混匀2-3次，确保蛋白充分溶解。
2. 活性测定（以酶类蛋白为例）
试剂准备：根据酶的催化特性，配制相应的底物溶液、辅助因子溶液、反应缓冲液等；确保所有试剂均为分析纯以上级别，且在有效期内。
反应体系优化：通过预实验确定酶的最适反应温度、pH值、底物浓度、酶浓度等参数；通常反应体系体积为50-200μL，酶浓度需根据活性高低调整。
检测操作：按照优化后的反应体系依次加入试剂，启动反应后，通过分光光度法、荧光法、比色法等检测方法，实时或终点检测底物消耗、产物生成的信号变化。
活性计算：根据检测到的信号变化值，结合摩尔消光系数、荧光量子产率等参数，计算酶的活性单位（U）；1U定义为在特定条件下，每分钟催化1μmol底物转化为产物的酶量。
3. Western Blot检测
样品处理：取适量复溶后的蛋白溶液，加入等体积的2×SDS上样缓冲液，沸水浴加热5-10分钟使蛋白变性；若蛋白含二硫键，可添加β-巯基乙醇或DTT辅助变性。
电泳分离：将变性后的样品加入SDS-PAGE凝胶的上样孔，同时加入蛋白Marker；先以80V电压运行浓缩胶（约30分钟），待样品进入分离胶后，调整电压至120V继续电泳（约60-90分钟），直至蛋白Marker分离清晰。
转膜操作：根据蛋白分子量选择合适孔径的PVDF或NC膜；采用湿转或半干转法将凝胶中的蛋白转移至膜上，湿转条件通常为200-300mA电流，转膜时间60-120分钟；转膜后可通过丽春红染色确认转膜效果。
封闭与孵育：用5%脱脂牛奶或BSA溶液封闭膜1-2小时，封闭非特异性结合位点；加入一抗（按说明书推荐比例稀释），4℃孵育过夜；次日用TBST缓冲液洗膜3次，每次10分钟；加入HRP标记的二抗（按说明书推荐比例稀释），室温孵育1小时；再次用TBST缓冲液洗膜3次，每次10分钟。
显色检测：将膜浸入ECL化学发光试剂中，避光孵育1-5分钟；使用化学发光成像系统曝光检测蛋白条带，根据条带位置和灰度分析蛋白表达情况。
公司正在出售的产品：
磷酸烯醇式酸羧激酶2(PCK2)重组蛋白 | Recombinant Human WNT4 | 3号染色体开放阅读框49封闭多肽 |
乙酰辅酶A乙酰转移酶1(ACAT1)重组蛋白 | Recombinant Human IFNGR1 | 锌指蛋白100封闭多肽 |
乙酰辅酶A乙酰转移酶2(ACAT2)重组蛋白 | Recombinant Mouse Serpin A1a | 轴突生长诱向因子4封闭多肽 |
天冬酰胺合成酶(ASNS)重组蛋白 | Recombinant Human PVRIG | 磷酸化上皮细胞癌转化蛋白2封闭多肽 |
Ⅴ组磷脂酶A2(PLA2G5)重组蛋白 | Recombinant Mouse Serpin A1a | 妊娠特异性糖蛋白4封闭多肽 |
蛋白二硫化物异构酶A4(PDIA4)重组蛋白 | Recombinant Human FAH | 肿瘤抑制基因Testin封闭多肽 |
ⅡA组磷脂酶A2(PLA2G2A)重组蛋白 | 人颗粒酶A(GZMA)活性蛋白Recombinant Human ZEB1 | FAM190B蛋白封闭多肽 |
Ⅲ组磷脂酶A2(PLA2G3)重组蛋白 | Recombinant Human MAGED1 | Ninein样蛋白封闭多肽 |
蛋白二硫化物异构酶A4(PDIA4)重组蛋白 | Recombinant Human casp9 | 卷曲螺旋结构域蛋白64封闭多肽 |
关键字： 人颗粒酶A;GZMA;活性蛋白;
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