本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，将抗大鼠IL-5特异性抗体包被于酶标板微孔内，作为固相捕获体系，样本中的IL-5抗原可特异性结合至固相抗体上，洗涤去除游离杂质后，加入酶标记的抗IL-5抗体完成夹心结合，通过酶促底物显色反应产生特异性显色信号，信号强度与样本中IL-5含量成正比，终止反应后检测吸光度，对照标准曲线完成定量检测。
基本参数：
产品名称：大鼠白介素5(IL-5)ELISA试剂盒
英文名称：IL-5 ELISA Kit
货号：Y-E1494
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度≤0.8pg/mL
检测范围：2pg/mL - 750pg/mL
反应时间：完整流程3.4小时
保存条件：2-8℃避光密封保存，试剂禁止冻存
有效期：未开封6个月，开封后2个月有效
显色系统：稳定型双组分TMB显色体系
检测波长：450nm主波长检测
标准曲线绘制：7个浓度梯度，拟合标准曲线，R²≥0.993
特异性：特异性结合大鼠IL-5，无其他白介素交叉反应
重复性：板内CV≤7.5%，板间CV≤9.5%
注意事项：样本避免污染、溶血；显色时间严格控制15-20分钟；上机检测前擦干板底水渍
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
IL-5 冻干标准品复溶配制梯度，试剂盒室温平衡 30min，标记酶标板孔；
标准孔加 50μL 标准品，样本孔加入大鼠细胞培养液 50μL，空白孔补稀释液；
加入 100μL HRP 标记抗 IL-5 抗体，覆膜封闭酶标板；
37℃避光孵育 62min，一步完成抗原标记抗体结合；
洗涤缓冲液浸泡 40s，吸干，连续洗板 5 次；
避光加显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光反应 15min；
终止液终止反应，450nm 检测吸光度，换算 IL-5 浓度。
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