本试剂盒运用双抗体夹心ELISA核心原理，微孔板包被抗大鼠M2-PK特异性捕获抗体，加入标准品与大鼠待测样本后，样本中的M2-PK抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗板去除非特异性结合物质，加入HRP标记的M2-PK检测抗体形成三元夹心复合物，经底物显色、终止反应后，检测吸光度数值，结合标准曲线定量测定样本中M2-PK的含量。
基本参数：
产品名称：大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒
英文名称：M2-PK ELISA Kit
货号：Y-E1327
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度≤0.2U/mL
检测范围：0.5U/mL - 100U/mL
反应时间：全程4小时，酶同工酶专属孵育流程
保存条件：2-8℃低温密封保存，禁止冷冻酶试剂
有效期：未开封6个月，开封后1个月有效
显色系统：代谢酶专用高稳定显色系统
检测波长：450nm精准检测波长
标准曲线绘制：7梯度酶活性标准品，拟合定量曲线
特异性：特异性识别大鼠M2-PK，不结合M1型等其他丙酮酸激酶同工酶
重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%
注意事项：酶蛋白对温度敏感，全程低温操作；避免剧烈震荡导致酶失活
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂室温平衡 28min，复溶 M2-PK 标准品做倍比稀释，标记酶标板；
标准孔添加 50μL 梯度标准品，样本孔加入大鼠肿瘤组织上清 50μL，空白孔加稀释液；
快速加入 100μL HRP 标记抗 M2-PK 抗体，覆膜封闭板面；
37℃恒温孵育 70min，一步同步结合样本抗原与标记抗体；
洗涤液浸泡微孔 30s，吸干残留液体，洗板 5 次；
避光加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光显色 14min；
终止液终止显色，450nm 测 OD 值，对照曲线计算 M2-PK 浓度。
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