本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测技术，微孔板固定纯化的抗大鼠C4特异性抗体，作为固相捕获体系，样本中的C4抗原与固相抗体特异性结合，洗板后加入辣根过氧化物酶标记的C4检测抗体，形成稳定的免疫夹心结构，经底物显色、终止反应后，检测各孔吸光度，依据标准曲线线性关系，精准定量大鼠样本中C4的浓度。
基本参数：
产品名称：大鼠补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒
英文名称：C4 ELISA Kit
货号：Y-E1229
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度≤0.4μg/mL
检测范围：0.8μg/mL - 180μg/mL
反应时间：全程3.5小时
保存条件：2-8℃低温保存，试剂密封防污染
有效期：未开封6个月，开封后2个月有效
显色系统：补体蛋白专属显色系统
检测波长：450nm主波长检测
标准曲线绘制：7梯度标准品，曲线拟合R²≥0.995
特异性：特异性识别大鼠C4补体蛋白，无其他补体交叉反应
重复性：板内CV≤6.8%，板间CV≤8.8%
注意事项：样本无溶血、无脂血；洗板彻底，消除非特异性吸附干扰
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
C4 标准品梯度稀释，试剂盒室温平衡 26min，标记酶标板所有微孔组别；
标准孔、待测孔分别加入 50μL 标准品、大鼠血清，空白孔填充稀释液；
即刻加入 100μL HRP 标记抗 C4 检测抗体，封板膜密封；
37℃恒温孵育 57min，一步完成抗原标记抗体结合；
洗涤缓冲液浸泡 40s，吸干，循环洗板 5 次；
避光加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光显色 13min；
终止液终止反应，450nm 读取 OD 值，换算 C4 浓度。
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