双抗体夹心免疫酶联吸附,酶标板固定抗 Bid 捕获抗体,样本中 Bid 蛋白特异性结合板底,HRP 标记检测抗体识别抗原第二表位,洗板显色测吸光度,OD 值对应样本 Bid 蛋白浓度。
产品参数:
产品名称 | 大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1187 |
英文名称 | Bid ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.16ng/mL,凋亡通路蛋白专属检测
检测范围:0.32ng/mL - 32ng/mL
反应时间:总时长100分钟,样本孵育70分钟,二抗孵育30分钟
保存条件:2-8℃避光冷藏,密封保存防止蛋白氧化
有效期:原装未拆封6个月有效期
显色系统:高灵敏TMB显色系统,低背景干扰
检测波长:450nm检测,620nm参比校正
标准曲线绘制:6梯度标准品,四参数拟合,R²≥0.997
特异性:专一识别Bid蛋白BH3结构域,无同源蛋白交叉反应
重复性:板内CV≤4.5%,板间CV≤6.5%
注意事项:样本低温裂解处理,防止凋亡蛋白降解;孵育条件严格恒定,保证结合特异性
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂室温静置 22min,洗涤液稀释 20 倍,组织裂解液样本混匀。
标准品稀释:Bid 冻干标准品复溶梯度稀释 6 浓度,空白调零孔。
加样孵育:50μL 标准品 / 样本 + 50μL HRP 酶抗体,封膜 37℃避光孵育 58min。
洗板操作:洗涤液浸泡 30s,拍干,洗板 5 次。
底物显色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 13min。
终止读数:终止液混匀,8min 内检测 OD450。
数据计算:曲线定量 Bid 蛋白,检测线粒体凋亡通路激活。
关键字: 大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白;Bid;ELISA试剂盒;
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