本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,包被大鼠PPAR-α特异性抗体于酶标板微孔,样本中的PPAR-α抗原与包被抗体特异性结合,结合酶标记检测抗体后发生显色反应,终止后读取吸光度,依据标准曲线精准定量大鼠样本中PPAR-α的表达含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1131 |
英文名称 | PPAR-α ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤8pg/mL
检测范围:15pg/mL - 650pg/mL
反应时间:总反应时长160分钟(样本温育100分钟、酶二抗温育30分钟、显色30分钟)
保存条件:2-8℃避光保存,严禁冷冻,试剂开封后密封防潮
有效期:未开封有效期8个月,开封后1.5个月内使用
显色系统:高灵敏度HRP-TMB显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:四参数逻辑拟合,R²≥0.993
特异性:特异性结合大鼠PPAR-α,与PPAR-γ无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%
注意事项:细胞核蛋白样本需充分提取;全程低温操作,防止受体蛋白降解
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒室温回温 30min,溶解 PPAR-α 标准品配制系列梯度浓度,排布酶标板各功能孔。
一步上样:标准孔加梯度标准品 100μL,待测孔加大鼠肝脏核蛋白提取液 100μL,空白孔加稀释液。
密封酶标板,37℃恒温孵育 77min,捕获核内 PPAR-α 受体蛋白。
弃液后洗涤液浸润每孔 32s,循环洗板 5 次,拍干孔底多余洗液。
非空白孔加入 HRP 酶联检测抗体 100μL,避光封板孵育 29min。
分加显色 A、B 液各 50μL,混匀后 37℃避光显色 14min。
加入终止液终止酶促反应,酶标仪 450nm 读数,换算 PPAR-α 浓度。
关键字: 大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α;PPAR-α;ELISA试剂盒;
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