大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，预先将大鼠sFAS特异性捕获抗体包被于酶标板，待测样本中的可溶性凋亡相关因子可与固相抗体特异性结合，洗板去除游离杂质后，加入酶标记sFAS检测抗体形成夹心复合物，经底物显色、终止反应后检测吸光度，吸光度数值与样本sFAS含量正相关，通过标准曲线精准定量目标蛋白水平。
基本参数‌：

产品名称：大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒

英文名称：sFAS/Apo-1 ELISA Kit
货号：Y-E1008

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度小于1.2 pg/mL

检测范围：5 pg/mL - 180 pg/mL

反应时间：全程130分钟（样本孵育70min、酶标孵育30min、显色30min）

保存条件：2-8℃避光干燥保存，严禁冷冻

有效期：未开封12个月，开封后30天内使用

显色系统：高稳定性TMB显色体系，低背景、高灵敏度

检测波长：450nm，600nm参比校准

标准曲线绘制：四参数对数拟合，标准曲线R²≥0.990

特异性：特异性识别大鼠sFAS/Apo-1，与凋亡相关的TNF家族蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%

注意事项：凋亡样本需及时处理，避免蛋白降解；显色终止后需立即读数，防止数值漂移；实验全程避免强光直射试剂。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 33min，稀释浓缩洗涤缓冲液待用。

划分酶标板孔位，空白孔只加稀释液，标准品、质控、待测稀释样本搭配酶标记试剂加入微孔。

密封酶标板，37℃孵育 67min。

洗板 5 次，浸泡 33s / 次，滤纸吸干板孔废液。

显色液避光 37℃显色 17min。

加入终止液终止反应并轻柔混匀。

450nm 检测吸光值，计算 sFAS/Apo-1 含量。
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